动物选择
选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作的研究工作,就必须了解哪种动物是高癌种,哪种是低癌种,各种动物自发性的发生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠,C3H/He系经产雌鼠有80~100%的自发性 。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。AKR系8~9月龄小鼠有80~90%自发性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同动物对同一因素的反应虽然往往是相似的,但也常常会遇到动物出现特殊反应的情况。如5岁以上的雌狗常自发性,如果给雌狗孕,就更容易诱发。雌还容易引起狗发生 ,这在其它实验动物是很少见的。怎样选择好实验动物可参看实验动物的选择和应用一讲。
实验动物的编号
编号
实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。
(一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。
(二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。
(三)法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下,也可用于兔、狗等动物。
(四)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有
涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。
涂染黄色:3-5%溶液。
涂染黑色:煤焦油的酒精溶液。
根据实验分组编号的需要,可用一种化学药品涂染实验动物动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多,则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉;对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法:该法适用于大、中型动物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。
(六)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1~ 9999号,此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。
HBV模型的建立方法
(1)方法:主要使用各种技术来创建HBV病毒小鼠模型。小鼠模型可分为HBV部分片段和HBV全长或超长序列模型。
(2)模型特征HBV小鼠不受HBV的影响,不会引起免yi清除。该模型可用于观察HBV对肝细胞的直接破坏作用。含有外源启动子的HBsAg小鼠(50-4)产生大量HBsAg大包膜蛋白。实验证明,长期喂食dan碱缺乏食物可诱发大鼠肝脂变、肝纤维化乃至gan硬化。这会导致很长的,有时是分支的杆状HBsAg积聚在肝细胞的内质网中,并且无法有效分泌。肝细胞显示出毛玻璃变色并损害肝细胞。小鼠中的HBV标记主要在gan脏中表达,也可以在shen脏,yi腺和外周血等qi官中表达,尤其是在1,096 bp 1.3拷贝的HBV小鼠中。xue清HBV DNA的水平相当于3x10000000至9x10000000基因组当量/毫升,相当于慢性HBVgan染者的水平。它可以检测血液中的HBsAg,S1前和HBeAg,是用于yao物筛选的you秀模型。
(3)建立比较yao物HBV小鼠模型在HBV分子生物学和免yi学研究中,特别是在加强肝细胞HBV感ran的分子机制方面,具有重要意义。
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