在医学教学、科研和医学工作中,不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物 实验方法 已成为医学科学研究和教学工作中的重要手段。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。因为书中比较详细地介绍了常用实验动物的解剖生理、生物学习性等等,主要的是它为你选择什么样的实验动物提供了重要的参考。
动物模型的设计原则
重复性
理想的动物模型应该是可重复的,甚至是可以标准化的。例如用一次定量放血法可造成出血,会si亡,这就符合可重复性和达到了标准化要求。又如用狗做xin肌梗死模型照理很合适,因为它的冠状动脉循环与人相似,而且在实验动物中它适宜做暴露心脏的剖胸手术,但狗结扎冠状动脉的后果差异太大,不同狗同一动脉同一部位的结扎,其后果很不一致,无法预测,无法标准化。对于PAN导致shen脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而,人们通过细胞培养和动物实验对其发生h发展机制进行不断的深人研究,也取得了可喜的成果。相反,大小白鼠、地鼠和豚鼠结扎冠脉的后果就比较稳定一致,可以预测,因而可以标准化。
实验动物各种体液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。注射脱氢表雄酮后,模型动物的luan巢重量显著增加并呈多囊样改变,对闭锁luan泡进行显微测量其平均直径明显增大。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。根据实验分组编号的需要,可用一种化学药品涂染实验动物动物背部被毛就可以。
2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常消化,从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。6、心脏采血:将动物,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮肤,在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进入。
(三)胰液和胆汁
在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。(六)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。
有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。
脓毒症模型
脓毒症模型方法及原理
一般构建脓毒症模型有多种方式,例如细菌攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等,针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺(CLP)。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种,主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染,从而模拟脓毒症的发生和发展。多种临床对抑yu症有效的yao物和zhi疗方法可逆转“获得性无助”现象。
实验方法
Step1:常规方法ma醉小鼠,剔除腹部毛发,酒精消毒
Step2:腹部正中开口,逐层打开皮肤和腹膜,暴露盲肠
Step3:使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置,挤出内容物
Step4:放置引流物,时盲肠内容物可持续流出
Step5:逐层缝合皮肤,碘伏消毒,将小鼠放回笼内饲养
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