病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:
多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。
不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。
多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。
醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。气管插管给药,这种方法首先必须确保你将管子插入气管,不是很直接,有一定的技术难度。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行组化检测时,有时需要对抗原***行修复,然后才能进行染色等后续操作。
病理实验外包,病理染色骨组织的处理方式:组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定后,需要先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。如果脱钙不全,则切片容易撕开或碎裂,损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程,称为脱钙。骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间,但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。
取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片
固定
以10%甲醛溶液固定2天
脱钙
将组织置于脱钙剂中,每日更换新鲜液,直至组织软化为止
除酸
流水冲洗24小时
脱水、浸蜡、切片
进行常规脱水、透明、浸蜡、切片 南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
病理实验外包,染色包埋的知识:知识点1:包埋的概念
组织经过固定、脱水、透明和浸蜡等过程后,用包埋剂(石蜡、火棉胶、树脂等)将组织块包埋成块,使得组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却,这个程序称为包埋。
知识点2:组织石蜡包埋法
石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法,包埋后的组织可以长期保存。包埋的方法有包埋机包埋和手工包埋两种。
知识点3:体液石蜡包埋法
痰液、胃液、尿液、、等可以行石蜡包埋。病理染色-尼氏染色大鼠脑海马区域尼氏染色尼氏染色可清晰的显示出尼氏小体定位,判断神经细胞是否受损。痰液应当选用含血液的部分或较为的实体部分,滴上伊红后用纸包好,然后用10%的中性甲醛固定,再经常规脱水,透明、浸蜡并包埋。新鲜的胃液、尿液、、等体液标本,倒去上层的澄清液体,将浑浊的液体放入离心管中,以转速2000-3000转每分钟离心15分钟,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后进行脱水透明、浸蜡、包埋。
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