动物模型设计注意事项
注意所选用动物的实用价值
模型应适用于多数研究者使用,容易,实验中便于操作和采集各种标本。同时应该一般饲养员较熟悉而便于饲养的动物作研究对象,这样,就无需特殊的饲养设施和转运条件,经济上和技术上容易得到保证。
此外,动物来源必须充足,选用多胎分娩的动物对扩大样本和重复实验是有益的。尤其对慢性疾病模型来说,动物须有一定的生存期,便于长期观察使用,以免模型完成时动物已频于或毙于。
在自然环境中观察有助于正确评价自然发病率和率。但记录困难,在实验条件下维持有一定难度,且对人和家畜有直接和间接的威胁,使用时要特别加以注意。因此,模型时必须注意动物种群的选择,要了解各类动物种群的特点和对动物的影响。
动物实验的管理
在建设中要充分的、尽可能的直接体现管理规范,充分考虑人为原因或可能的人为失误、尽量避免人为出现可能因素的存在;在管理上要尽可能避免设施的不足或缺陷和可能出现的漏洞,使设施可能的规范管理或充分发挥设施潜在的可进行的规范管理。
实验动物的抓取和固定
在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。
睡眠剥夺模型
实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,上面放水和食物。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。水温和室温保持在25 C,每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, REMS) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。
旷场实验( open field test, OFT )
实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一摄像机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,大鼠置于方箱底面中心,同时进行摄像和计时,3 min 后停止摄像,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。
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