动物模型的设计原则
相似性
在动物身上人类疾病模型。目的在于从中找出可以推广(外推)应用于的有关规律。外推法( Extrapolation )要冒风险,因为动物与人到底不是一种生物。例如在动物身上无效的不等于临床无效,反之也然。将动物固定,显露尾部,将尾尘剪去约5mm,从尾根部向尾端部,血即从断端流出。因此,设计动物疾病模型的一个重要原则是,所的模型应尽可能近似于人类疾病的情况。
能够找到与人类疾病相同的动物自发性疾病当然。例如日本人找到的大白鼠原发性就是研究人类原发性的理想模型,老母猪自发性冠状动脉粥样硬化是研究人类的理想模型;自发性狗类性与人类幼年型类性十分相似,也是一种理想模型,等等。
动物模型设计注意事项
注意所选用动物的实用价值
模型应适用于多数研究者使用,容易,实验中便于操作和采集各种标本。同时应该一般饲养员较熟悉而便于饲养的动物作研究对象,这样,就无需特殊的饲养设施和转运条件,经济上和技术上容易得到保证。
此外,动物来源必须充足,选用多胎分娩的动物对扩大样本和重复实验是有益的。尤其对慢性疾病模型来说,动物须有一定的生存期,便于长期观察使用,以免模型完成时动物已频于或毙于。
在自然环境中观察有助于正确评价自然发病率和率。但记录困难,在实验条件下维持有一定难度,且对人和家畜有直接和间接的威胁,使用时要特别加以注意。因此,模型时必须注意动物种群的选择,要了解各类动物种群的特点和对动物的影响。
动物选择
选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作的研究工作,就必须了解哪种动物是高癌种,哪种是低癌种,各种动物自发性的发生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠,C3H/He系经产雌鼠有80~100%的自发性 。AKR系8~9月龄小鼠有80~90%自发性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同动物对同一因素的反应虽然往往是相似的,但也常常会遇到动物出现特殊反应的情况。如5岁以上的雌狗常自发性,如果给雌狗孕,就更容易诱发。(一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。雌还容易引起狗发生 ,这在其它实验动物是很少见的。怎样选择好实验动物可参看实验动物的选择和应用一讲。
睡眠剥夺模型
实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,上面放水和食物。水温和室温保持在25 C,每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, REMS) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,再爬上站台。造模后14d,行闪光视觉诱发电位检测,处死大鼠取眼球,观察各组大鼠视wang膜和视神经的病理形态,行视wang膜神经节细胞计数。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。
旷场实验( open field test, OFT )
实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一摄像机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,大鼠置于方箱底面中心,同时进行摄像和计时,3 min 后停止摄像,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。
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