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来源:2592作者:2020/8/30 18:37:00






结合BI生产的基础培养基,Minimal Essential Medium是基本的培养基, 设计之初是为了培养HeLa细胞以及部分哺乳类的成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。




CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有细胞膜通透性,能够自由进入细胞;当CFSE扩散穿过细胞膜,会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发,发出绿色荧光,这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合,形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖,胞内荧光蛋白会被平均分配到下一代细胞中,因此细胞荧光强度会随着增殖代数增加而不断地降低,可用流式细胞仪进一步侦测分析得出细胞分裂增殖的情况。CFSE的浓度,对于终判断细胞增殖结果有直接性的影响!




细胞衰老的检测:1.DNA损伤检测,在衰老细胞中会启动DNA 损伤信号p53,细胞衰老通路p53是被细胞DNA损伤而受到DNA损伤回应通路的激。2. β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal)活性染色,β-半乳糖苷酶主要位于溶酶体, 当细胞衰老发生时, 溶酶体膨胀并且增多, β-半乳糖苷酶明显积累在溶酶体中, 因此SA-β-gal染色法为检测细胞衰老普遍常见的指标。不过在一些特殊情况下,例如,饥饿引发的细胞休眠(quiescence)也会出现SA-β-gal染色呈现阳性。





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