将细胞冻存管由液态氮中取出,置于室温回温,不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养 基、无菌15ml离心管、培养瓶。在生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。 倒去上清液,重悬细胞,移到培养瓶中培养。
细胞衰老的检测,检测端粒功能,分析检测细胞端粒序列的长度和端粒逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)的活性来评估端粒的功能(高表达的端粒逆转录酶,使得端粒的长度不会随DNA复而缩短,让细胞获得持续分裂的能力);但此检测方法很难成为常规标准分辨细胞衰老,主要原因是因为无法建立一致性的标准,在不同物种之间细胞发生衰老时,其端粒长度不具有可比性; 即使来源于同一物种(如人细胞)。
细胞骨架不仅在维持细胞形态、承受外力、保持细胞内部结构有序性方面起重要作用,而且还参与许多重要的生命活动,如:在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离;在细胞物质运输中,各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向运转。细胞骨架在20世纪60年代后期才被发现。主要因为早期电镜制样采用低温(0-4℃)固定,而细胞骨架会在低温下解聚。人们才逐渐认识到细胞骨架的客观存在。
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