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外泌体的发现在是1983年,由加拿大麦吉尔大学生物化学系Rose M. Johnstone研究小组在体外培养的绵羊红细胞上清液中发现的,在当时该研究小组只是认为这是一种有膜结构的细胞小囊泡,并且觉得这种小囊泡能够把细胞生长发育过程中不必要的蛋白质从一个细胞携带至另一个细胞,这样就很快被断定小囊泡是细胞代谢的“垃圾”。但随着研究的不断深入,在1987年的时候Johnstone研究小组再次把小囊泡命名为“exosomes”外泌体。一直到2013年,经过近30年的不断深入探索,外泌体在细胞间运输调控的机制被再进一步深入挖掘,也因此美国科学家(James E. Rothman、Randy W. Schekman)和德国科学家(Thomas C. Südho)共同获得2013年诺贝尔生理医学奖。
外泌体是细胞分泌的胞外囊泡的一种,它的主要成分是磷脂双分子层和携带相关内容物,所以并非是所有的细胞分泌出来的囊泡都可称之为外泌体。现在普遍是采用离心法去提取外泌体,将细胞培养上清液通过0.22um孔径大小的过滤器,接着再进行下一步的离心,之所以采用这个方法的原因是可以减少外泌体制剂的污染,并且同时能够使其中较大的囊泡从滤液中有效分离。外泌体的提取可以从多种体液中提取出来,如人的血液、尿液、和唾液等地方提取,也可以通过从多种细胞培养上清液中提取。
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外泌体鉴定:
外泌体分离之后,需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物,多角度进行鉴定。
(1)透射电镜鉴定法:简称TEM,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,即通常为茶托型或—侧凹陷的半球形。
(2)纳米颗粒跟踪分析法:简称NTA,该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快,检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。
(3)Western blot分子标志物检测:外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9、CD63和CD81;细胞质蛋白,如肌动蛋白(Actin)和钙磷脂结合蛋白(Annexins);参与生物功能的分子,如凋亡转接基因2互作蛋白X (ALIX)、易感基因101蛋白(TSG101)、热蛋白(HSP70、HSP90),以及细胞分泌的特异性蛋白。
什么是外泌体人到中年,难以启齿的矛盾便是脸上越来越多的和内心与日俱增的
“抗老需求”之间的矛盾。为了今天的容颜不被明天改变,什么、水光针甚至是美容,我都勇于“尝鲜”。而作为美容界的后起之秀——“外泌体”,我更是不愿错过。毕竟它虽然是近两年兴起的美容模式,但其发展历史也已经有40多年了,而它的美容功效更是,比美容有过之而无不及,一时间,关于外泌体美容的宣传铺天盖地,可谓是风头无两,颇有“江湖大佬”的地位。但也正因为如此,我们更要科学严谨的对待外泌体美容,了解它的原理,才能更好的应用它。
外泌体,从字面上看,就是细胞向外分泌的物体。科学释义是:细胞所分泌的直径为30~150nm的双层磷脂囊泡,主要功效成分包括蛋白质类物质及micRNA类核酸物质。
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