注意事项
1.为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项;
2.试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落;
3.Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,睛有刺激作用;
4.此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断;
5.细胞的洗涤同常规方法。
Mg放在ALP等含有镁离子项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Ca放在a-amy项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差,Mg试剂(calmagite法)中含有EGTA,会干扰Ca的测试结果。另外我们发现相邻两个项目的PH值相差较大或反应对PH要求严格的项目,也会对测定结果产生影响, TBA放在TP,ALB,UA,后边测定,会使测定结果偏低等等。解决办法:a、调整试验的前后顺序来消除这种影响;b、在造成污染的项目和受污染的项目之间设置清洗并设定清洗的次数。
3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤:
1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。
2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中,加入足够量浓度的生物素,一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数,对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍,或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中
3. 室温30分钟,或冰上放置2小时。
4. 用30 ml PBS预洗纯化柱,上样,加入与欲收集量相同的缓冲液,收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。
冰箱保存时间不超过2个月
原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。在常温下(15℃~25℃)保存时间一般不超过2个月。超过2个月要重新标定或检查之后再用。按规定配制并消毒好培养基,冷至室温,保存在阴暗处(尽可能贮藏在冰箱内),配制好的培养基应在1个月内用完。
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