细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）高亲和力特异性结合。以融合蛋白Annexin Ⅴ-***P作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。

注意事项

1.为保证得到理想的实验结果，在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项；

2.试剂（尤其是小瓶装的试剂）在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落；

3.Propidium iodide（PI）能通过皮肤吸收，睛有刺激作用；

4.此试剂盒仅供科研使用，不宜用于临床诊断；

5.细胞的洗涤同常规方法。

在全自动生化分析仪使用中，我们发现一个项目会影响紧随其后项目的测试结果，造成这种影响的原因之一是一种实际中含有另一试验的测定物质而直接干扰其测试结果。比如：在TP试剂中含有大量的CUSO4,如果将Cu放在TP项目的后面检测，会使检测结果偏高或重复性差。再如P放在含有磷酸盐的项目后面，TBA放在含有胆酸盐的项目后面都会使检测结果偏高或重复性差。

3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤：

1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中，并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液（如Tris或者甘氨酸），可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算：蛋白质量（mg）/蛋白分子量（MW）＝蛋白质的毫摩尔数。

2. 在打开之前，平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中，加入足够量浓度的生物素，一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数，对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍，或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中

3. 室温30分钟，或冰上放置2小时。

4. 用30 ml PBS预洗纯化柱，上样，加入与欲收集量相同的缓冲液，收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。