聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤:
1、凝胶的制备:
将聚丙烯酰胺加入适量水溶解,制成浓度约为0.1m g/ml的凝胶液;
2、电泳槽的准备及预试:
用去离子水冲洗干净后,然后均匀地滴上一定量的胶体溶液(约10 ml/g);
3、电泳时间的选择:
一般以30~40 min为宜。
聚丙烯酰胺凝胶电泳注意事项:
1. 电泳时必须严格按操作规程进行,否则有可能造成样品降解和污染等不良后果;
2. 凝胶液的pH值应控制在6.5~8.0之间,过高或过低都会影响分离效果;
3. 胶体的浓度不宜太高、太低或过于粘稠,太稀会影响分离效率和灵敏度;
4. 在做分子量测定时应选择合适浓度的聚丙烯酰胺产品进行实验;
5. 使用过程中应注意避免与金属容器发生反应;
6. 避免使用强酸强碱类试剂清洗器皿和管道系统。
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