实验操作小贴士

1、实验应在超净工作台或者生物安全柜内进行；

2、实验的过程中选择尺寸的手套并能及时更换，在进出不同实验区域或进行模板操作后都应更换实验服、口罩、帽子及手套，以避免不同实验区交叉污染；

3、装有PCR试剂的反应管在打开之前应先瞬时离心，将管壁及管盖上的液体离至管底，降低污染手套或加样器的风险；谨慎开启反应管，防止管内液体溅出或形成气溶胶导致污染；需要高温加热的样本，可采用封口膜进行PCR管盖密封，避免管盖应受热而发生弹开；

4、吸加试剂和模板的操作应严格按照规范要求进行，遵守“慢吸快打”原则，尽量一次性完成，忌多次抽吸，以避免气溶胶产生的交叉污染；

5、PCR试剂建议小量分装，以减少反复冻融、重复取样次数和反复使用过程中的试剂污染；多样本PCR反应时，先配制反应混合液分装至反应管中，加入样本核酸，请勿同时开盖，尽量保证单人单管，实现完全闭管操作；

6、实验试剂应与样品和PCR产物分开保存，不应放于同处；

7、PCR扩增实验完成后及时将反应管取出，用一次性手套或者塑封袋将产物反应管包裹丢弃，保证管盖紧闭；

8、实验室自配试剂（去离子水、缓冲液等）和所有使用器具在使用之前均应高压灭菌或紫外杀菌，尖、反应管等实验耗材应一次性使用。

如何防止PCR实验室气溶胶污染？

现实生活中，我们可以通过开窗通风、佩戴口罩等防护用品来降低气溶胶传播风险。类似地，目前PCR实验室主要通过以下措施来防范和控制实验室污染：

（1）建设独立的PCR实验室，按试剂准备区、样本制备区、扩增及产物分析区进行严格分区，把低污染风险操作和高污染风险操作在空间上隔离开来。

（2）打造专门的负压通风系统，控制实验室空气从低风险区向高风险区单向流动，避免保存试剂被一次性全部污染。

（3）制定严格的实验室管理条例，控制人员物品单向流动，要求操作人员全程严格进行360度无死角全身防护。

（4）抬高实验人员门槛，需要经过上级单位规范培训、考核并获得“PCR上岗证”的人员方能上岗工作。

（5）PCR反应液分装保存，减少重复加样次数，降低试剂被污染风险。

（6）在PCR试验中加入内标、阴阳性对照等质控，监测检测结果，避免出现假阴性或假阳性。

（7）实验室温度控制在18~27℃，湿度控制在30%~70%。

（8）定期使用75%乙醇、含氯消毒剂和核酸去除剂及紫外线照射进行消毒等。

pcr实验室个性化用药

药理学和基因组学的发展，阐明了代谢和效应个体差异的遗传本质，异常反应主要是因为代谢酶基因变异而导致酶活性异常，进而导致服药后体内未能被正常代谢、消除而排出体外,使得体内浓度过高或过低，达不到理想的治果。这种异常反应，可通过检测与患者所服用相关的遗传基因，调整剂量或寻找替代，地制定出更合理、有效、经济的方案。

示例：个体化用药指导检测：CYP2C19基因突变检测试剂盒、CYP2C9基因突变检测试剂盒、ALDH2基因突变检测试剂盒、MTHFR基因突变检测试剂盒。

方法学：荧光PCR法。

用途：氯吡格雷、华法林、甘油及叶酸均为临床上常见的，用药指导分子生物学检测，明确基因分型，药学部临床药师根据检测结果，并综合考虑患者自身因素、临床诊断以及联合用药等相关信息，为临床出具个体化用药建议。

标本类型：全血（本试剂盒无需提取DNA，加样直接PCR）。

检测流程：

（1）配制反应体系（在样本准备区完成）→（2）直接加入全血（在标本制备区完成）→（3）PCR 扩增（在扩增区完成）→（4）结果分析与判定。

其他同类项目：他汀类用药（ApoE）、β受体阻滞剂（ADRB1）、儿童安全用药、靶向个性化用药（***R、kRAS）类。

适合开展的医院和：医院、医院、第三方、各种级别的有需求的医院。