PCR实验室合并情况

PCR不同区域可合并情况（一）

场景：使用实时荧光PCR仪

依据：关于印发《机构临床基因扩增管理办法》的通知；机构临床基因扩增检验实验室工作导则；卫办医政发〔2010〕194号

合并：扩增区、扩增产物分析区可合并

PCR不同区域可合并情况（二）

场景：采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪

合并：标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

实验室污染分类

样本间交叉污染

主要是在采（取）样的过程中，由于取样工具之间的交叉造成污染；或者在核酸提取的过程中，由于移液器、离心管等使用不当导致的污染。

PCR试剂的污染

主要是在PCR试剂配制过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。

质粒的污染

在实验室操作中经常会用到阳性参考品，这些阳性参考品大多数是由某些质粒制作而成，质粒在单位容积内浓度高，不小心使用极易造成污染。

PCR扩增产物污染

这是PCR反应中常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可造成假阳性结果。还有一种容易忽视，可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染，在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶，据计算一个气溶胶颗粒可含4.8万拷贝，因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。

pcr实验室病原体测定

PCR技术的问世使病原体检测能够快速、方便地进行。由于PCR技术假阳性率太高，只要有微量病原体存在就可得到阳性结果，这并不能作为诊断依据，只有当一定数量的病原体存在时才有临床意义。因此，对模板准确定量显得特别重要，应用荧光技术PCR就能够快速、准确地得到结果。对于解决学检测的“窗口期”问题，判断疾病是否处于隐性或亚临床状态，以及检测不能判定是现症还是既往时，均可利用PCR进行确定。

示例：新型冠状病毒核酸检测。

方法学：荧光PCR法。

用途：用于体外定性检测新型冠状病毒的疑似病例、疑似聚集例患者、其他需要进行新型冠状病毒诊断或鉴别。

检测基因：新型冠状病毒（2019-nCoV）ORFlab和N基因、E基因。

标本类型：上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子；下呼吸道标本：呼吸道抽取物、肺泡灌洗液样本、肺组织活检标本。

检测流程：

（1）核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）→（2）样本的灭活（56℃灭活30分钟）→（3）样本的核酸提取（手工、核酸提取仪）→（4）PCR体系的配制和模板加样→（5）上机检测及结果分析→（6）检测后的消毒。

其他病原体检测：HIV、甲乙丙肝、HPV、肺支、肺衣、EB病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族链球菌。

适合开展的医院和：儿童医院、妇幼、儿检所、第三方、各种级别的有需求的医院。

十万级净化车间究竟是什么“鬼”？

   净化车间在食品、行业的应用甚是广泛，此外还有很多科技配件需要在净化车间中完成，但净化车间是分万级的，那你知道GMP十万级净化车间又是什么“鬼”吗？

   GMP适用于制药、食品等行业领域的强制性标准，要求企业从原料、设备、人员、包装运输等方面按照相关法规达到卫生质量要求，从而形成一套可操作的作业规范帮助企业改善企业卫生环境，及时发现在生产过程中存在的问题，并进行改善。

   简而言之就是GMP要求食品生产企业具备良好的生产设备、合理的生产过程、完善的质量管理、严格的检测系统，以便保证产品质量符合法规要求。

   根据美国联邦颁布的标准，可将GMP净化车间分为6个等级：1级、10级、100级、1000级、10000级、100000级。若等级只用尘粒数目来叙述，我们可以假设尘粒的尺寸为0.5um。

   为保持无尘室的洁净，通常要求进出人员具备一定的穿着规格：10000级、100000级，必须穿着长袍无尘衣、无尘鞋、带帽子与面罩。1000级(含)以上穿着特殊洁净连身衣、无尘鞋将全身包裹住，并带上手套与面罩，所有生产流程需全部与外界进行隔离。

   基本较低就是十万级，百级的净化车间是目前洁净程度较高的洁净室。