PCR管

（1）渗漏密闭性：将n个PCR管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min，没有墨汁渗出为合格。

（2）离心密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入离心机，1000 rpm，30min，管盖未崩开未漏液为合格。

（3）热密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，再进行称重，PCR管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。

（4）冷密闭性：将n个PCR管加入半量纯水，放入-20℃冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。

（5）污染物质检：将n个PCR管加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置5min，作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（6）抑制物质检：将n个PCR管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min，然后进行提取;RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。

（7）空白荧光通透性：对于qPCR,需要考察PCR管是否有非特异性荧光信号，将n个空PCR管，盖好盖子后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR无扩增为合格。

（8）阳性荧光通透性：对于qPCR,还需要考察PCR管是否会抑制荧光的通透性，将n个含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管，与确认无荧光干扰的PCR管，盖好盖子后放入PCR仪一同扩增，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR扩增未被抑制为合格。

PCR实验室的潜在污染来源

①临床标本中存在的大量待测微生物或待测靶核酸

②科研中得到的质粒

③以前分析研究的特定微生物或靶核酸

④大量存在于实验环境中的特定微生物或靶核酸

⑤以前扩增产物的残留污染,这也是 PCR 实验室产生的将造成假阳性的“污染”。

PCR扩增可以引起实验室中扩增产物的累积,通常一次典型的PCR

扩增可以产生109拷贝的靶序列,如果气溶胶化,甚至的气溶胶都会含有106拷贝的扩增产物。如果不加以控制,在短期内累积的气溶胶化的扩增产物即会污染实验室中的试剂、仪器设备和通风系统,从而造成严重的实验室“污染”,出现大量的假阳性结果。

pcr实验室院感管理

1.进入各工作区域应当按照单一方向进行，即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区。

2.各区域的设备、清洁用具标记明确，不得混用。

3.各区域的衣服用不同颜色标记，离开各区域时不得将工作服带出。

4.试验台用移动式紫外线灯消毒，高度60-90cm。扩增区延长照射时间，是过夜照射。同时各区域还需安装悬挂式紫外线灯管。

5.各试验区尽量避免不必要的走动和进出，减少风险。

6.扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。

净化车间工作状态

 在一般情况下，高粉尘含量会致使干净度降低，而低粉尘含量容易导致洁净度。在净化车间的建设合同中，通常只会基本的空状态测试，而因时间紧迫，经常错过静态和动态测试。但仍建议承建商和业主在静态和动态条件下都对净化车间进行测试。可有效保证净化车间的建造符合相关设计要求。在静态和动态两种不同条件下的测试结果对比，分析净化车间存在的问题，并提供有效帮助。例如：在静态条件下，洁净度达标，但到了动态条件下，却超标。

   因净化车间管理措施发生失误而致使：安装机器时，不标准的清洁，不恰当的清洁程序，不严格的纪律管理，不正确的机器放置位置（将回风口挡住，或对过滤器的送风阻断）等。因此，建议在空态和动态时，都要对净化车间进行测试。

   所有的净化车间测试，基本都是基于国际认可标准上。 这些标准和实践为净化工厂的测试和认证提供了基本指导。事实上，净化车间的业主和承建商因产品，工艺要求对技术指标，测试方式，验收标准有着不同协议。因此，很多验收标准由净化车间的业主和承建商通过协商，并参考净化车间测试认证公司的建议达成协议。