PCR实验室污染的防控及消除

1、试剂储存和准备区。贮存试剂和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过扩增检测区，试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区，应当保存在标本制备区；

2、标本制备区。由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染，可通过在本区内设立正压条件，避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在危险性的材料，必须在生物安全柜内开盖，并有明确的样本处理和灭活程序；

3、扩增区。为避免气溶胶所致的污染，应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是，所有经过检测的反应管不得在此区域打开；

4、扩增产物分析区。本区是的扩增产物污染来源，因此必须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。废液及用过的吸头必须收集至HCl中，不能在实验室内倾倒，浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理。由于本区有可能会用到某些可致基因突变和有毒物质如化乙锭、酰胺、甲醛或性核素等，故应当注意实验人员的安全防护；

5、注意物品流向，依次为：试剂准备区、样本制备区、扩增区、产物分析区，不可逆行；

6、试剂准备区、样本制备区和扩增区内的实验用品应，并设置不同的标识、颜色等予以区分。

pcr实验室实验操作注意事项

尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因，样品间的交叉污染也是原因之一。因此，不仅要在进行扩增反应是谨慎认真，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意：

1.戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套；

2.使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染；

3.避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面；

4.操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的度；

5.加入反应模板，加入后盖紧反应管；

6.操作时设立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性；

7.尽可能用可替换或可高压处理的加样器，由于加样器受产物气溶胶或标本DNA的污染，使用可替换或高压处理的加样器。

如没有这种特殊的加样器，至少PCR操作过程中加样器应该，不能交叉使用，尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区；

8.重复实验，验证结果，慎下结论。

净化车间标准操作流程大揭秘

   净化工作台实际上就是给净化车间提供局部高洁净度环境的空气净化设备。其使用对改善环境条件，提升产品质量、增加产品率具备效果。下面小编同学为大家揭秘下有关净化车间的相关标准操作流程。

   新安装或长时间未使用的设备，在使用前必须达到对净化车间不产生影响。

   在设备安装并清洁干净后对设备进行系统检测与调节，让设备达到工作状态以及使用要求。

   当电源接通后按照控制面板所提示的操作流程进行。启动紫外灯开关并让其照射30min后关闭紫外灯。启动风机开关，设备自净10min至20min后方可进行工作，工作完后后将风机关闭并切断电源。使用75%酒精棉擦拭操作台面。

   在净化车间内尽量不要堆放不必要的物品，避免影响气流以及灭菌效率。

   当预过滤器表面发黑、容纳尘埃较多时，明显发现阻力加大此时应将预过滤器中的无纺布进行清洗并进行调换。

   每个月对净化车间进行检测与打扫。

   注意！

   在净化车间中工作时应尽量保持轻缓，避免破坏工作环境。

   风速过大会减短过滤器的使用寿命，所以使用时间应调节到合适的风速。

    室内需流通的空气，在室内中安装通风工程，从而得以确保风流的畅通性，在安装过程中，要保证通风设备的防漏工作。一旦密封过程出现失误，就会让整个通风工程效果处于不理想状态。通风工程就是送风、排风、送风、气力输送、排烟系统工程的总称。下面让我们一起去看看有关通风工程堵漏的正确步骤详情吧!

   1、清理：确定灌浆孔位置、间距。将施工区域清理干净，并将表面析出物清除干净。

   2、钻孔：利用钻孔工具，沿着孔洞周围钻泄压孔，钻孔须斜穿过主漏水孔，但不得将结构打穿。

   3、埋嘴：观察主漏水孔压力，水流不急且压力不大时，可用快干堵漏剂埋注灌浆止水针头。当结构达到一定强度还未出现渗漏时，其它泄水孔分别安装膨胀止水针头，再用内六角扳手将其拧紧。若墙面出现慢渗情况，也应按照相应顺序安装膨胀止水针头。

   4、灌浆：利用高压灌浆机试压，向灌浆孔内灌注化学灌浆料。单孔逐渐且连续进行。当相邻孔开始出浆后，保持压力即可停止本孔灌浆。待所有孔都灌完后，回到之前的灌浆孔，再次对其进行灌浆作业过程。

   5、拆嘴：灌浆完成后，确认不漏，即可去掉、敲掉外露的灌浆嘴，并将灌浆液清理干净。

   6、补强：用密封剂对易渗漏部位进行封堵，用聚合物JS防水涂料。

   在通风工程中，要格外注意漏水情况的发生，在施工过程中一定仔细观察，发现问题及时修补，这样才能提升整个通风工程的质量。