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一九四一年,玛蒂恩等将饱和硅胶作为固定相,用含乙醇的作为流动相,分离乙酰基氨基酸是个应用分配色谱。在总结已有成果的基础上,提出了的色谱塔板理论。
液固色谱是先创立的色谱方法,初大多采用碳酸钙、硅胶、氧化铝填充的玻璃柱管,其流动相加于柱管±端,靠重力作用下移;组分检测依赖肉眼观察或将吸附剂从柱管中取出,再进行进一步分析。液-固色色谱问世50多年来,在液-固色色谱设备上还没有实质性的进步。20世纪60年代以前,随着 GC知识的积累, GC的系统理论和实践经验被应用到液相色谱研究中,开发出细粒度填充色谱柱,大大提高了液相色谱的分离能力。用高压泵输送流动相代替重力作用,提高了柱的效率,加快了液相色谱分析的速度。LC和光学检测器的结合,使它从初的以分离为主要目的,发展成为同时完成分离分析任务的重要分析手段。
伴随着固定相的发展和装柱技术的发展,液相色谱柱效不断提高。此外,还提出了以精细粒径固定相为基础的 HPLC的应用。
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离子色谱是液相色谱中的一种,但由于其结构和分析对象不同于普通液相色谱,所以它一般作为一个都独立的色谱大类。离子层析与液相色谱的区别主要从仪器结构和应用范围两个方面进行。
在仪器结构方面,离子色谱和液相色谱都有溶剂输送系统、进样系统、检测系统和信号记录和处理系统,但由于离子色谱和液相色谱所用的流动相不同,检测方法和信号处理的要求也不同,各部分也存在一定的差异。如下所示
离子色谱一般是用酸、碱和盐的水溶液作为流动相,所以通常离子色谱都是用非金属材料作为整个体系材料,一般都是用 Peek塑料作耐高压部件,如泵体、流道和阀体,而聚四氟乙烯材料作为检测器,外接管路等,要求系统耐酸、耐碱,一般用 Peek塑料作泵体、流道和阀体等要求耐高压的部件。但是液相色谱由于一般都是用有机溶i剂做洗涤剂,所以大多数的溶剂还是用金属泵体,可以耐任何种类的有机溶i剂,但对于酸、碱的溶剂,使用后容易发生腐蚀。由于液相色谱在生物领域的广泛应用,金属对某些生物活性化合有一定的吸附作用,生物方面的一些应用液相色谱也广泛采用了 Peek材料作为泵体、流路和阀门,从而使离子色谱和液相色谱具有一定的通用性。
SCIEX毛细管电泳仪代理——广州联方实验器材有限公司可为您提供实验室和生产所需要的SCIEX耗材
在一种介质中,带电粒子在直流电场作用下发生的定向运动称为电泳。单元电位下的电泳速度被称为滴度。用无i限稀释溶液(稀溶液数据外推)测得的浊度称为绝i对浊度。
带电离子在电场中的运动,除受电场力的作用外,还受溶剂阻力的影响。经过一定的时间,两种力的作用将达到平衡,此时离子做匀速运动,电泳进入稳态。真实的溶液活度不同,尤其是酸碱度不同,因此,样品分子的离解度不同,电荷也会发生变化,这个时候的浊度就可以称为有效电泳。一般而言,离子的电荷越多、离解度越大、体积越小,电泳的速度就越快。
电渗透、表面渗流和表观渗透是推动样品迁移的另一重要动力。电渗流是毛细管中的溶剂在轴向直流电场作用下发生的一种定向流动。电渗入是由定域电荷引起的。定域电荷是离子或带电基,它们牢固地粘结在管壁上,在电场作用下无法迁移。固定域电荷吸引溶液中的反号离子,并使溶剂与其组成的双电层发生整体定向运动(以及在电场作用下的碰撞),从而形成电渗流(在毛细管中电渗流呈平头塞状)。
在电泳条件下,毛细管区从阳极向阴极流动。通过 Zeta电位、双电层厚度及介质粘度等因素的影响,一般而言,双电层越薄,粘度越小,电渗流值越大。
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2019年9月1日, SCIEX全i球同步发布多通道毛细管电泳 BioPhase?8800系统,该系统能同时分析8个样品,容量达96个样品,高i效创新的连接上下游工艺,加快了产品上市速度。
目前生物制药分析面临着诸多挑战,如何缩短药i物的研制时间、缩短药i物的开发时间、分析更多样本,特别是分析药i物分子,加快筛选和表征,将高通量检测从早期阶段向常规质量控制过渡,需要更全i面、更深入、更迅速地表征分析。与传统的 HPLC相比较,毛细管电泳技术具有分离效i率高、模式多、分析速度快等优点,已广泛用于中国药典、美国药典中,用于生物技术药i物的纯度、等电点、电荷异质性、糖基分析。
SCIEX BioPhase?8800多通道毛细管电泳系统
具有下列性能特征:
1.八通道毛细管分离同时进行高通量并行分析
2.简化的硬件设计提高系统的耐用性和重复性
3.简化方法制定和数据分析软件,加快了从样品分析到报告结果的时间
4.数据处理过程中容易参数优化,数据处理菜单直观
5.预装卡盒、验证试剂盒和消耗品,轻松实现从现有 SCIEXPA 800 Plus药i物分析系统到BioPhaseTM8800系统的方法转移
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