武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士***创办。比如：targetP、SubLoc、WoLFPSORT等……。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供的生物技术服务。

亚细胞定位技术服务实验流程：

构建载体——测序验证成功后转大肠——扩增大肠——获得大量载体——PCR——构建表达载体——转化农、注射/转化拟南芥/原生质体——取样品共聚焦观察。

亚细胞定技术位服务实验注意点：

1、有共定位要求的蛋白，客户提供蛋白定位预测结果，我们选择相应的marker载体进行共定位。如果观察结果和预测不一致，则应该是蛋白原因而不是观察原因。如果需要二次观察则另外收取样品观察费用。

2、实验结果：提供清晰的荧光图，明场图，merge图。

3、交付数据：数据图、质粒测序结果、质粒及大肠。

4、提供拟南芥、水稻、等原生质体。

5、Marker种类：线粒体、叶绿体、细胞核定位、细胞膜定位、内质网

6、可以在实验后保留瞬时转染的叶片供后续检测。

武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士***创办。4、实验完毕后清理实验台面，将载玻片清洗后用75%酒精浸泡，以备回收使用。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供生物技术服务。

4、客户需要提供的信息：

4.1、目标基因ORF

4.2、基因名称等注释信息，如果特别要求请在备注中注明。

4.3、如果不是我公司代为构建载体，客户需提供质粒（质粒浓度为>200ng/ul）以及菌液各一份。注明菌液抗性，荧光蛋白的颜色或者激发光和发射光波长。亚细胞定位

武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向***提供生物技术服务。

蛋白在原生质体中合成，而新合成的蛋白必须要运输到细胞的特定位置才会发挥其作用。神经、白细胞、等代谢极为活跃，即使不缺氧也常有糖酵解提供部分能量。蛋白的亚细胞定位注释信息可以为科研工作者们对蛋白的功能分析，蛋白互作等提供参考与支持。研究未知蛋白生物学功能通常是获得其亚细胞定位信息，亚细胞定位在细胞分子生物学，蛋白质组学，系统生物学，药1物开发，药1物化学等领域研究中具有十分重要的作用。

原理：构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体，转染细胞，表zhi达，然后激光共聚焦显微镜dao观察荧光信号所在位置，即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。

具体步骤：构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体，基因***轰击洋葱内表皮细胞，或化学（PEG）转化原生质体，瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置，当然激光共聚焦图片会更漂亮。