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来源:2592作者:2021/11/7 2:56:00






武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。




2) 激1素,包括小分子量的甾体激1素等。

3) 抗生1素和药1物。

4) 病原体抗原,HBsAg、HBeAg等。

5) 另外,也可利用纯化的抗原检测标本中的抗1体,例如抗-HBs等。

5.标记的免疫测定

如上所述,免疫测定是一种很敏感的测定方法,抗原抗1体反应后直接测定形成的沉淀或浊度,敏感度可达5~10μg/ml,但在临床检验中,某些待测物在标本中的含量远低于这一水平,因此要寻找增加敏感度的方法。标记的免疫测定是将检测试剂中的抗原或抗1体用可微量测定的物质加以标记,通过测定标记物来提高敏感度。在放1射免疫测定和酶免疫测定中,标记物分别为放1射性核素和酶,后用测定放1射性和酶活力来计算待检物的量,敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记免疫测定中,一般加入过量的标记试剂以保证与待测物***反应。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克1隆技术来说,细胞培养都是一个***的过程。以标记抗1体(Ab ※)检测抗原(Ag)为例,反应式如下:





6.酶免疫测定

酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年1初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联免疫吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。





12.水洗

用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝(或放入碱性水中也可),但要注意流水不能过大,以防切片脱落。

13.分化

将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色,约2秒至数十秒钟。见切片变红,颜色较浅即可。

14.漂洗

切片再放入自来水流水中使其恢复蓝色。

15.脱水Ⅰ

切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各5min。

16、复染

用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。

伊红主要染细胞质,着色浓淡应与苏1木1精染细胞核的浓淡相配合,如果细胞核染色较浓,细胞质也应浓染,以获得鲜明的对比。反之,如果细胞核染色较浅,细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染,促使细胞质容易着色,并且经乙醇脱水时不易褪色。包埋包埋时,用镊子夹取石蜡模子(金属质地)在酒精灯上稍加热,放在平的桌面上,从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯,倒入少许石蜡。





17.脱水Ⅱ

将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min。后用吸水纸吸干多余的乙醇。

18.透明

切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。

二甲本应尽量保持无水,应经常更换,或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象,说明脱水未尽,应退回乙醇中重新脱水,否则切片难以镜检。

19.封藏:中性树胶封存

因切片经二甲本透明,使用中性树胶作为封藏剂,树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。



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