武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
【储存条件及有效期】
储存条件:2到8℃保存,避光。
有效期:12个月。
【自备仪器】
酶1标仪,移液器
【使用方法】
1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加入底物显色液A,显色液B各50 μL(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,在37°C下温育10-30分钟。
2、每孔加入终止液,15 min内在450 nm波长处测定各孔溶液的OD值。
6.组织样本如何处理?
用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。(2)有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。
1.取材
切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以6mm×6mm×5mm为宜。
注意事项:
(1)取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。
(2)切片材料应根据需要观察的部位进行选,尽可能不要损伤所需要的部分。
2.固定
将切好的组织用生理盐水组织洗3次,立即投入10%中性1福尔1马林固定液或4%多聚甲醛中固定,固定36小时。
(1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。
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