武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域
7.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法?
小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗1体夹心法进行测定,可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗1体愈少,后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。使切片颜色变蓝(或放入碱性水中也可),但要注意流水不能过大,以防切片脱落。
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
6、 尿液、唾液等其他液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可检测。
总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。
为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本1好在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。
另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。
1.3.3 特异性
抗原抗1体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗1体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。例如乙1肝1病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和***抗1体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗1体结合,而不与另外两种抗1体反应。抗原抗1体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血1清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。50岁以下的成人血浆NT-proBNP浓度450pg/ml诊断急性心衰的敏感性和特异性分别为93%和95%。
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