PCR技术的本质是体外核酸扩增，加热使双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板DNA杂交，在Taq DNA聚合酶，dNTPs，Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物，重复 “变性→退火→引物延伸”过程至25～40个循环，呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。

普通的PCR仪

一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，又叫传统的PCR仪。

用途：主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。

（1）梯度PCR仪： 一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度)，通常为12种温度梯度的普通PCR仪。

用途：研究未知DNA退火温度的扩增。

（2）原位PCR：将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析，在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。

用途：用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。

所谓real-time Q-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在 real-time 技术的发展过程中，两个重要的发现起着关键的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现，它能降解特异性荧光记探针，因此使得间接的检测PCR产物成为可能。（2）此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致real-time Q-PCR方法在研究工作中的运用。


从分子生物学的发展过程，可以看到在近半个世纪中它是生命科学范围发展为迅速的一个前沿领域，推动着整个生命科学的发展。至今分子生物学仍在迅速发展中，新成果、新技术不断涌现，但分子生物学的历史还短，积累的资料还不够。例如：在地球上千姿万态的生物携带庞大的生命信息，迄今人类所了解的只是的一部分，还未认识核酸、蛋白质组成生命的许多基本规律；又如即使到2005年我们已经获得人类基因组DNA3×109bp的全序列，确定了人的5-10万个基因的一级结构，但是要搞清楚这些基因产物的功能、调控、基因间的相互关系和协调，要理解80%以上不为蛋白质编码的序列的作用等等，都还要经历漫长的研究道路。可以说分子生物学的发展前景光辉灿烂，道路还会艰难曲折。

1、良好的实验室管理中包含了对仪器的定期质控。

2、定期对PCR仪进行温度测定可以完善实验室的质量管理体系。

3、PCR仪的温度条件和状态对于PCR试剂盒的研发和应用来说，是的条件之一。

4、根据测温的结果可以避免某些试剂盒对某些特定品牌型号仪器的依赖，拓宽试剂盒的应用范围。

5、在合格的仪器上做实验可以极大的节约人力物力。

6、对于拥有老旧仪器和高强度使用的实验室来说，节省效果尤为明显。