●打开水浴锅加热至37℃。
● 超净台上放好离心管(离心管规格选用15ml的),细胞培养瓶,移液管,紫外灭菌至少20至30分钟,吹风5至10分钟除去臭氧。
● 37℃预热好要复苏细胞的培养液,也可以不用预热培养液,根据细胞情况选择。
●向离心管中加约5至10ml培养液,从液氮罐或-80℃中取出冻存细胞,立即将冻存管放入37℃水浴中并轻轻摇动,待融化后(约2min即可)立即将解冻的细胞转移至含培养液的离心管中,800-1000rpm下离心5min,弃上清,加适量完全培养液轻轻吹打重悬细胞后转移至细胞培养瓶中,轻晃使瓶底液体分散均匀,标好细胞名称、代数、复苏日期,显微镜下观察后放入37℃,5%CO2培养箱中。一般贴壁细胞过夜即可贴壁,换液和传代时间根据不同细胞生长情况而定。
塑料的离心管又有PP(聚)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。
1.PP(聚):半透明,化学及温度稳定性较好,但是在低温下会变脆,所以在离心时不要在4℃以下。
2.PC(聚碳酸酯):透明度较好,硬度大,可以高温消毒,但不耐强酸强碱以及一些如酒精之类。主要用于5万转以上的超高速离心。
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