RCCS转壁式生物反应器在细胞增值技术中的应用！

细胞增殖检测技术

       目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂

       的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从干扰组细胞数大于对照组的事实说明可促进细胞增殖的结论。所以直接的证据应该采用方法一。

其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克X隆形成。

细胞周期检测技术

细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。

常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。

细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。

细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验

其他实验

细胞程度：软琼脂实验

细胞屏障：跨膜电阻、荧光黄透过率

细胞粘附实验

共培养实验

裸鼠成瘤实验

RCCS-3D模拟微重力三维动态培养系统能够使细胞贴壁免受机械损伤！

RCCS-3D模拟微重力三维动态培养系统能够使细胞贴壁免受机械损伤。

       RCCS-3D旋转三维细胞培养系统是一种不同于普通转瓶培养的系统。转瓶包含一个纵轴封瓶以及周围包裹的弹性塑料壁。在这种情况下，气体运输是通过瓶颈。并且，转瓶培养的目的不是三维培养，而是二维培养。培养物沿着瓶壁生长，并且，当瓶转动，培养物就会与媒介接触。因此，这两个系统之间没有相似性(参见问题1RCCS生物反应器的工作原理)。

       对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨1髓样细胞可以释放蛋白酶，血1清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血1清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血1清蛋白形成了血1清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血1清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解1毒中起重要作用，如SeO3,硒等。