反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶1剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶1剂或其水溶液进行溶质的洗脱分离。将溶剂入口管从过滤头和瓶盖组件处拨下,如果管线中充满溶剂,当过滤头性能良好时,溶剂会自由地从管中滴出.如果堵塞,就没有溶剂或只有很少量的溶剂从管中滴出。溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,分配系数越大。当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。RPC主要应用于相对分子质量低于5000,特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化,也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为强烈疏水性,并且流动相为低极性的有机溶1剂,生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。
1、高惰性超纯中性硅胶制成,每根色谱柱同时提供柱效与填料性能报告; 2、半制备色谱采用目前的设计方式即顶端自带手动加压装置,具有国际的轴向压缩技术;色谱柱的老化色谱柱安装和系统检漏工作完成后,就可以对色谱柱进行老化了。 3、与国内单位合作即柱筒内壁采用精密的抛光技术和同心化技术,使往壁的光洁度(>}12,即表面粗糙度尺a }0.1 um)超过了国内外同类产品并保证了柱管的同心度(0.2um),很好的保证了产品质量的稳定性和; 4、能维持足够高内压,柱床不会塌陷导致柱效急剧下降;如果柱床出现松动塌陷,无需任何工具,只需轻轻旋动顶 端加压装置,便能恢复原柱内压力和柱效;
中压液相色谱(MPLC)柱压在5-20bar(或75-300psi)之间,广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等--往往需要经过滤膜作初级净化)的处理,以提取或纯化所需的产品。等所有问题解决后,将色谱柱出口从瓶中取出,保证柱端口无溶剂残留,再进行下一步的安装。 高压液相色谱(HPLC)是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2,000~20,000的范围之间。