原位杂交过程

　　杂交前可进行预杂交，以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同，只是预杂交液中不含探针和硫酸葡聚糖。

　　靶DNA的变性（对mRNA的原位杂交无需此步）

　　样品DNA的变性在DNA-DNA杂交检测中是必须的步骤，但同时可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性，实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。

　　如使用热变性方法，可在杂交时将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性，染色体DNA样品处理2min，后冷却至37℃进行杂交。组织样品DNA的变性时间可增加至80℃10min。

　动物实验检测原理：

　　动物模型是在生物医学研究过程中所建立的具有人类疾病性模拟性表现的动物疾病材料，这种方法是促进生物医学的发展的一种重要的途径，无论在疾病的发生和发展过程中，都起到了至关重要的作用。其中，模型是生物医学领域中为常用的动物模型之一，它包括皮下模型、模型及原位模型等。

　　通过建立小鼠荷瘤数据模型，研所生长本质机器发展规律，从而寻求对生长及转移有抑制作用的及方法。

肝纤维化动物模型

模型概述：

1. 任何可引起肝损伤的因素长期、反复作用于，均可产生肝细胞变性、坏死，继而肝和纤维组织，导致肝纤维化。

2. 已有化学性损伤、性、生物学、酒精性和营养性肝纤维化模型。每种方法因致病因素不同，给药途径不同，产生的机理、纤维化出现早晚、稳定性、出现率、重复性及机体自然患病过程相似程度等都不尽相同。

动物模型评价：

1. IDA大鼠早期(Hb≤100g/L)表现为毛发生长差、脱毛、眼球肿胀突出、苍白、兴奋为主，晚期(Hb≤60g/L)表现为倦怠、活动减少，易为主；

2. 血液学及生化检查表现为血红蛋白及铁(功能池)、浓度(交换池)、运铁蛋白及铁含量(贮存池)均显著低于正常对照组。其中以血红蛋

白和铁的变化较敏感。

3. 低铁饲料喂养大鼠5、6周即可出上述表现，F344、Wistar大鼠的反应性优于SD大鼠。

4. 此模型形成期短、稳定、可行，是研究IDA的一个可靠动物模型。