动物实验检测技术在动物疫病防控中的作用
在国内动物疫病检测中,检测人员需要预先在实验室内将动物的产品及动物有关物品开展检查、检测,并根据实际的检测结果,开展动物疫病的防控,并建立科学完善的防控体系。疫病防控单位需要组建实验室,并为实验室配备的检测仪器,配备的检测人员,进而提高实验室的检测能力和检测水平。
原位杂交过程
杂交前可进行预杂交,以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同,只是预杂交液中不含探针和硫酸葡聚糖。
靶DNA的变性(对mRNA的原位杂交无需此步)
样品DNA的变性在DNA-DNA杂交检测中是必须的步骤,但同时可能会造成样品形态学的部分破坏,此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性,实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。
如使用热变性方法,可在杂交时将探针的变性和样品DNA变性同步进行:将样品和探针溶液加盖盖玻片,置于烘箱80℃变性,染色体DNA样品处理2min,后冷却至37℃进行杂交。组织样品DNA的变性时间可增加至80℃10min。
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