保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或血。如果中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。此IBL试剂盒能用于小鼠,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测
试剂盒成分1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T2 酶标记: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被(或抗原)的选择:将(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。
A.富含DNA酶的胰脏、、胸腺、淋巴等组织。B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,温和研磨30秒钟。注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入Solution A及RNase A1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl,65℃保温5分钟。
使用贴壁细胞时:① 弃尽培养液,向培养皿中加入650 μl的Solution A,室温静置1分钟。注)96孔板等的每个孔中一次容纳不了650 μl 溶液时,请分数次处理细胞。② 用移液的头吹落贴壁培养细胞,取650 μl的细胞悬浮液转移至Collection Tube中。③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振荡15秒钟,然后室温静置1分钟。2. 加入400 μl的Solution B,振荡混合。3. 加入1 ml的4℃预冷的Solution C,充分混匀后,12,000 rpm离心2分钟。4. 弃去上层有机相,再加入1 ml的4℃预冷的Solution C,充分混匀后,12,000 rpm离心2分钟。