注意事项：从原理上讲，所有菌都可用瓷珠菌保存管保存。菌保存的原理是DNA-copy时自发突变导致菌退化，因此要创造代谢不活泼的状态，干燥、低温、缺氧、缺营养的环境，创造的环境越接近此状态，所保存的菌的时间就越长。但需要注意的是，由于苛刻菌(如流行感嗜血杆l菌、脑l膜炎萘瑟氏菌)等特殊细菌保存时，需-80℃或更低温度保存，才可以做到更长期的保存。

我们现提供的冻存管，为第二代菌之种。菌之种传代前应准备好适于该菌之种生长的液体、固体培养基和培养设备，所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。取一支冻存管于室温下自然解冻，取适量接种于液体培养基，或划线接种于固体培养基中按规定培养、传代。注意：已经解冻的冻存管应在24 小时内使用，不能再冷冻保存，以免冻融！

应用领域——生物学方向细胞冻存技术是生物学保存物种的重要手段。在环境遭到未有过的破坏动物、植被随时可能面临灭l绝危险的今天，更是尤为关键，虽然不是治本的方法，但至少可以尽可能的留下那些曾经存在的生命痕迹。

发展历史：1. 1776年, Spallanzani尤早发表了“冷”处理对“细胞”生命活动影响的报道。2.十九世纪中后叶，许多早期的工作者(Prevost, 1840; de Quatrefages, 1853; Mantegazza, 1866; Scheuk, 1870) 重复研究了低温处理对精l子活动的影响，得出了和SpalLanzani相似的结论。即“冷不能杀l死精l子”。

(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4C冰箱中2~3小时，再移至冰箱冷冻室内3~4小时(此步可省略)，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，之后沉入液氮中。

分布降温法：细胞系冻存程序：1)单层细胞的消化。将经24~48小时培养已长成单层的传代细胞培养物弃去生长液，加适量ATV，1~2分钟后倒弃ATV，再加入少量ATV液，经0.5~1分钟倒去ATV，室温或37oC温箱作用2~3分钟，视细胞解离情况，拍打细胞培养瓶。使单层细胞完全解离。SP2/0瘤细胞，待生长好后用吸管吹打，再经1000转1分离心10分钟。