单个TKgst突变体DI、LF、FI和LI 在大肠 BL菌株中表达并进行纯化。将TKgst突变体与型TKgst对(S)-羟基酮-的活性进行了比较（Chart ）。(S)-,,-trihydroxybutan--one (l-erythrulose，) 是型TK的非磷酸化底物之一，被选为对照。型和突变体对表现出的活性，除了DI，它是被脂肪链取代的极性残基。非极性残基Ile代替Asp显着降低酶的活性，可能是由于缺乏与的C的羟基的相互作用。脂肪链对其他非极性残基的突变对活性没有影响。

与Gly相比，代替His的非极性Ala或Val残基（HLHALI 和 HLHVLI）具有较低的活性，因为它们具有较高的空间位阻，这阻碍了的非极性头部与 HL 的相互作用。与 Gly 相比，极性和或带电的Ser和Glu代替 H (HLHELI) 也导致较低的活性，这可以通过Ser的极性侧链和与D冲突的Glu的负电荷来解释，这种环境使的非极性头部朝向HL的位置不稳定。 规模制备具有脂肪族 α-羟基酮裂解活性的TKgst 突变体随后在乙醇醛存在下对和裂解反应进行了制备规模的研究。

与HLH（G或A）L相比，这些突变体随着时间的推移（在°C下）具有更高的热稳定性。HLHSLI活性位点的分子模型表明，Ser在位的存在有利于与Asp 的相互作用，这对于稳定链A或B的Asp 和链B或A的Arg 之间的桥似乎很重要。产物的对映体过量(ee  ) 表明存在一种主要的对映体，表明TKgst突变体对C有高度的立体选择性控制。

图(d)显示了Kapp为-酚-酚-酚,-二酚，这归因于共轭、归纳和空间效应的共同效应。图?(a)SSBC-的循环性能；(b) (b) SSBC-在不同水环境中还原-酚的ln (CtC)随时间的变化曲线。图(a)显示了SSBC-的循环性能，在使用次后，SSBC-在min内仍可以还原的-酚，表明具有良好的循环性能。为了估计SSBC-在真实水生系统中的催化效率，尝试在自来水、湖水和河水在内等不同水样中还原-酚，结果如图(d)所示。