单宁广泛存在于植物的芽、叶、根、树皮和果实以及寄生于植物的昆虫所产生的虫瘿中,主要用于食品、化妆品、革鞣、造纸、墨水、印染、橡胶、冶金等工业以及水处理等方面,也可作为蛋白质的沉淀剂、啤酒和葡萄酒的澄明剂、橡胶的凝结剂等。
我公司针对单宁物质,建立一整套的检测方法,可提供总单宁含量检测、单宁单体含量检测、单宁分子量检测等。详见下表。
服务名称 |
服务内容 |
测试方法 |
服务周期 |
总单宁含量 |
测定样品中总单宁含量 |
化学法 |
15个工作日 |
单宁单体含量 |
测定样品中1茶素、没食子酸、单宁酸等8种单体含量 |
HPLC、LC-MS |
15个工作日 |
单宁分子量 |
测定单宁多聚体的分子量 |
GPC-RI-MALS、MALDI-TOF |
15个工作日 |
单宁种类很多,分子结构复杂,差异也大,但可分成二大类:可水解鞣质(单宁酸,tannin acid)与缩合鞣质(condensed tannin)两种。
可水解鞣质具有酯式或甙式结构,大多数由没食子酸(Gallic acid)或其衍生物与葡萄糖结合而成,糖上的每一个醇羟基都与没食子酸上的一个羟基结合成酯,可被酸、碱、酶水解。含这类鞣质的中草药有、没食子、石榴果皮等。水解鞣质在1药上已提纯应用为1炎收敛药,名鞣酸。没食子酸(Gallic acid)及单宁酸(可水解鞣质,tannin acid)标准品可以获得,可以利用HPLC分析、定量。
缩合鞣质 一般由1茶素(Catechin)组成,结构复杂,不能水解,加酸加热能产生一种缩合物质--鞣酐(或名鞣红Phlobaphenes),中草药中的鞣质多数属于缩合鞣质。对1倍子鞣质的结构有不同看法,一般认为代表性的结构式为β-五-间双没食子酰葡萄糖。因为没有固定的聚合度,因此分析起来比较棘手。
针对于缩合鞣质,一般分析思路为:
1、通过酸解将缩合单宁水解为黄酮类单体,再通过HPLC分析单体的重量及含量;
2、通过13C-NMR分析缩合单宁中可能存在的键合结构;
3、通过MALDI-TOF分析缩合单宁的聚合度;
4、即使经过上述步骤,只能获得缩合单宁的单体信息,键合信息、聚合度,亦不能解析缩合单宁的缩合顺序。
公司设备平台包括离子色谱、凝胶色谱、毛细管电泳、GC-MS、HPLC-MS、DSC、TGA等多种高实验仪器,并配备了一批的博士、硕士研发人员。公司还享有武汉生物技术研究院公共技术服务平台,该平台投资金额超过8000万元,平台总面积约5000平方米,配备生物实验大型仪器设备243台套,是华中地区设备***、功能齐全的生物实验仪器共享平台。
华士特生物采用UPLC配合Q Exactive 质谱仪建立了单宁类物质的靶向定量检测方法,该方法检测限低、重复性好、定性定量准确。
业务流程
样本要求
1.取材要求
A 时间一致性原则
同一批次样本取材时间尽量保持一致,控制在1h之内。
B 生理一致性原则
同一批次样本取材生理位置保持一致,例如第四片展开页,第五茎节等。
C 地理位置一致性原则
同一批次样本生长环境保持一致,温室苗、盆栽苗、大田苗应区分。
D 迅速性原则
取材要迅速,需要冷藏或干燥的要快速冷却或失水处理。
2.样品类型
新鲜植物样本:2-10g;固体样本:1-5g;液体样本:0.2-5ml;粪便样本:0.2-2g;土壤样本:5-20g。
3.储存和运输
新鲜样本以干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输)。
目前,随着人们对单宁化学结构、生理活性、化学性能等各方面的不断探索,对单宁改性高分子材料方面的研究具有越来越浓厚的兴趣,例如单宁聚氨酯的研究已有新的进展,用二异、聚酯、黑荆树树皮单宁合成出的聚氨酯泡沫,随单宁比例的加大,泡沫的压缩强度和弹性也加大,单宁起到交联剂的作用,这种泡沫还有一定的生物降解性。以单宁、木质纤维素、二异制备的高交联硬性泡沫具有耐热性,用单宁和木质素作混凝剂可制备吸音绝缘材料等。
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