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细菌DNA纯化服务至上「多图」
来源:2592作者:2022/4/14 15:12:00







RNA病毒检测试剂盒产品特点:

1. 冻干粉为逆转录酶和Taq酶的预混液,将RNA逆转录与qPCR扩增两个过程合并,一步完成,减少移液次数、避免交叉污染、操作简单,节约时间。

2. Taq酶具有70°C热启动功能,显著提高试剂盒的特异性和敏感度。

3. 主要组分为冻干粉,4℃保存,储存运输方便,性能稳定。

武汉友名生物(U-MeBiotech)技术有限公司成立于2009年5月18日。公司致力于为广大科研工作者提供品质的生命科学产品和、有效的技术服务。公司对所有岗位员工都经过了严格的培训,对所销售的产品及其使用都比较熟悉。同时,在公司内部定期开展自我提高学习培训,由各岗位员工对所销售的产品进行系统培训学习,并进行严格的考核。这都为公司的化服务提供了有力保障!公司目前主要从事分子生物学,蛋白质研究、细胞学研究,NGS等相关产品的销售及技术服务,同时也开展生物化学原料的合成,实验技术服务。



回收产物的检测

1.紫外分光光度计法检测DNA在OD260处有明显吸收峰,当OD260=1时,相当于大约50 ng/μL双链DNA、40 ng/μL单链DNA。OD260/OD280≈1.6~1.9时,说明DNA纯度较高。若洗脱时不用洗脱缓冲液,而是用去离子水,会使比值偏低,因为离子的存在会影响吸光度。但不表示纯度低。

2.SYBR法检测取回收产物1 μL,与1 μL SYBR染料混匀,于荧光透1视仪下观察是否有黄绿色荧光。

3.琼脂糖凝胶电泳法检测取回收产物5 μL,与10×Loading Buffer混匀,DNA Marker加5 μL,电泳后凝胶成像观察。5 μL DNA Marker相当于每个条带50 ng DNA,观察目的条带亮度大致为Marker的两倍,则大致估算其浓度约为20 ng/μL。



植物DNA的“一管法”提取方法:1 称取100mg新鲜植物组织,剪碎置于1 5ml离心管中,可加入少许无菌石英砂,加入3滴提取缓冲液,用带玻璃钻头的电钻充分研磨匀浆。2 加入400μl提取缓冲液,混匀后置于90℃水浴中,不时颠倒摇匀。3 温育20min后,置于冰浴中5min,使组织和聚乙烯聚吡咯烷酮(polyvinylpolypyrrolidone,PVPP)沉淀,置于4℃下保存备用。



DNA提取过程中各种试剂的作用及原理

  溶液I—溶菌液:

  溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。

  葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。

  EDTA:

  (1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);

  (2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。



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