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第二代1992年由比利时Palermo医师及刘家恩博士等在人体成功应用卵浆内单***注射（ICSI），使试管技术的成功率得到很大的提高。国内医学界将ICSI称为第二代试管技术。ICSI不仅提高了成功率，而且使试管技术适应症大为扩大，适于男性和女性***症。第二代技术发明后，世界各地诞生的试管迅速增长，每年美国出生的婴儿有5万名。第二代试管技术， 解决因男性因素引致的***问题。

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