武汉默沙克生物‍‍‍‍科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。

3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低，孵育时间过短 提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 试剂超过有效使用期 及时更换试剂 操作中，滴加试剂时缓冲液未沥干，致 使试剂稀释 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 组织中无抗原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

但是这种特异性也不是绝1对的。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗1体反应中可出现交叉反应。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。例如：绒毛膜促性1腺激1素（hCG）和黄体生成激1素（LH）均由α和β两个亚单位组成，其结构的不同处在β亚单位，而两者的α亚单位是同类的。用hCG免疫动物所得的抗血1清中含有抗α-hCG和抗β-hCG两种抗1体，抗α-hCG抗1体将与LH中的

α酶位发生交叉反应。在临床检验中，如用抗hCG抗血1清作为妊1娠诊1断试剂检定尿液中hCG，只能用于hCG浓度较高的试验，否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH将与之发生交叉反应。重链和轻链的N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异，称为可变区，分别用VH和VL表示。因此在作为早1孕诊断（敏感度应达到50mIu/mlhCG）的实际中必须应用只对hCG特异的抗β-hCG，以避免与其它激1素的交叉反应的发生。

17．脱水Ⅱ

将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色，然后放入无水乙醇中3-5min。后用吸水纸吸干多余的乙醇。

18．透明

切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。

二甲本应尽量保持无水，应经常更换，或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象，说明脱水未尽，应退回乙醇中重新脱水，否则切片难以镜检。

19．封藏：中性树胶封存

因切片经二甲本透明，使用中性树胶作为封藏剂，树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。