武汉默沙克生物‍‍‍‍科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、ELISA试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的***产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。

研究发现，脑钠肽（以下简称BNP）对心衰的早期诊断、早期干预以及预后有很大帮助。在2001年修订的欧洲心脏病学会心衰诊疗指南中，已经把脑钠肽作为心衰诊断的工具。2005年欧洲和美国的指南，均进一步肯定了脑钠肽在心衰诊断中的作用。

   脑钠肽是心脏细胞产生的结构相关的肽类激1素家族钠尿肽中的一种。当心功能不全时，由于心脏容量负荷或压力负荷增加，心肌受到牵张或室壁压力增大，会使血中BNP的指标浓度增1高，而这恰恰是诊断心衰较为敏感的指标。可以独立预测左心室舒张末期压力升高状况。（4）材料固定完毕后，保存于严密紧塞或加盖的容器里，同时在容器外上标签，并随同材料在溶液中投入相应的标签，以免相互混淆。因此，BNP可以作为一个更好的预示心衰状况的指标。

NT-proBNP<300pg/ml为正常，可排除心衰，其阴性预测值为99％。心衰治1疗后NT-proBNP＜200pg/ml提示预后良好。1功能不全，小球滤过率<60ml/min时NT-proBNP 1200pg/ml诊断心衰的敏感性和特异性分别为85％和88％。1．取材切取的组织块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以6mm×6mm×5mm为宜。NT-proBNP值正常可以排除心衰（阴性预测值接近100%）NT-proBNP有助于区分心源性和非心源性呼吸困难 NT-proBNP值的高低与伴有呼吸困难心衰的症状严重程度相关在急性心衰的诊断中，NT-proBNP明显优于临床判断，而二者联合的方法又优于单一诊断方法。

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7.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗1体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗1体愈少，后的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。注意事项：（1）取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。

3、  细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、  细胞裂解液

1）  吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2）  收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3）  加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。