如何避免细胞抱团?1,用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞。2,无血清细胞冻存液公司,对于贴壁非常牢固的细胞(如MDCK),为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,建议分多批多次消化,这样才能大限度地将胰酶对细胞的损伤降到低,无血清细胞冻存液电话,保证细胞的状态能够优。3,消化过程中不要使劲摇动培养瓶,这样细胞特别容易成屑样脱落。细胞一旦脱落入悬液里就很难再将他吹打成单个(因为细胞没有受力点了,无血清细胞冻存液出售,所以细胞很难分散开)。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,严格控制好消化程度。
细胞衰老的检测:1.DNA损伤检测,在衰老细胞中会启动DNA 损伤信号p53,细胞衰老通路p53是被细胞DNA损伤而受到DNA损伤回应通路的激。2. β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal)活性染色,β-半乳糖苷酶主要位于溶酶体, 当细胞衰老发生时, 溶酶体膨胀并且增多, β-半乳糖苷酶明显积累在溶酶体中, 因此SA-β-gal染色法为检测细胞衰老普遍常见的指标。不过在一些特殊情况下,例如,饥饿引发的细胞休眠(quiescence)也会出现SA-β-gal染色呈现阳性。
合成培养基(Synthetic/Artificial medium)由高纯度化学成分(无机盐、氨基酸、维生素、含碳物质等)与纯化水配制而成,所有成分都可知其确切含量;合成培养基可依实验目的可分为以下三种。短时间保存细胞活性,即各类平衡盐溶液,福州无血清细胞冻存液,具有特定的pH和渗透压;能维持细胞离开生物体后几小时内的活性。延长细胞存活时间,即基础培养基,在平衡盐溶液中添加各种有机化合物,配合适当的实验操作条件,可将细胞培养至多代。特殊功能,根据实验目的(分化、增殖等),将基础培养基额外添加各类因子的特殊培养基。
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