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若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,南平胎牛血清,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后,建议检测细胞存活率。
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MTT检测法,细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,胎牛血清公司,死细胞则无此现象。接着用二甲亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出细胞数量。在一定细胞数范围内,吸光值与细胞活性成正比。
细胞骨架不仅在维持细胞形态、承受外力、保持细胞内部结构有序性方面起重要作用,胎牛血清电话,而且还参与许多重要的生命活动,如:在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离;在细胞物质运输中,各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向运转。细胞骨架在20世纪60年代后期才被发现。主要因为早期电镜制样采用低温(0-4℃)固定,而细胞骨架会在低温下解聚。人们才逐渐认识到细胞骨架的客观存在。
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