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色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。1906年Tswett 研究植物色素分离时提出色谱法概念;“堵”的原因:不适当操作常见问题有以下几种:(1)在更换零件时选择的型号有误,接口不是很匹配,在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。他在研究植物叶的色素成分时,将植色谱物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。按光谱的命名方式,这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义,但仍被人们沿用至今。在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。
柱流失检测在色谱柱老化过程结束后,利用程序升温作一次空白试验(不进样)。一般是以10℃/min从50℃升至使用温度,达到使用温度后保持 10min。这样我们就会的到一张流失图。这些数值可能对今后作对比试验和实验问题的解决有帮助。在空白试验的色谱图中,不应该有色谱峰出现。如果出现了色谱峰,通常可能是从进样口带来的污染物。如果在正常的使用状态下,色谱柱的性能开始下降,基线的信号值会。另外,如果在很低的温度下,基线信号值明显的大于初始值,那么有可能是色谱柱和 GC系统有污染。其他:色谱柱的保存用进样垫将色谱柱的两端封住,并放回原包装。在安装时要将色谱柱的两端截去一部分,保证没有进样垫的碎屑残留于柱中。因此在定期清洗进样器,使用缓冲液后,要用水进行充分的冲洗,以防沉积结晶盐,磨损转子。注意:当空气中氢气的含量在4-10%时,就有的危险。所以一定要保证实验室有良好的通风系统。
1、高惰性超纯中性硅胶制成,每根色谱柱同时提供柱效与填料性能报告; 2、半制备色谱采用目前的设计方式即顶端自带手动加压装置,具有国际的轴向压缩技术; 3、与国内单位合作即柱筒内壁采用精密的抛光技术和同心化技术,使往壁的光洁度(>}12,即表面粗糙度尺a }0.1 um)超过了国内外同类产品并保证了柱管的同心度(0.2um),很好的保证了产品质量的稳定性和; 4、能维持足够高内压,柱床不会塌陷导致柱效急剧下降;如果柱床出现松动塌陷,无需任何工具,只需轻轻旋动顶 端加压装置,便能恢复原柱内压力和柱效;制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。
柱流失检测在色谱柱老化过程结束后,利用程序升温作一次空白试验(不进样)。一般是以10℃/min从50℃升至使用温度,达到使用温度后保持 10min。这样我们就会的到一张流失图。这些数值可能对今后作对比试验和实验问题的解决有帮助。在空白试验的色谱图中,不应该有色谱峰出现。如果出现了色谱峰,通常可能是从进样口带来的污染物。如果在正常的使用状态下,色谱柱的性能开始下降,基线的信号值会。另外,如果在很低的温度下,基线信号值明显的大于初始值,那么有可能是色谱柱和 GC系统有污染。其他:色谱柱的保存用进样垫将色谱柱的两端封住,并放回原包装。在安装时要将色谱柱的两端截去一部分,保证没有进样垫的碎屑残留于柱中。因此在定期清洗进样器,使用缓冲液后,要用水进行充分的冲洗,以防沉积结晶盐,磨损转子。注意:当空气中氢气的含量在4-10%时,就有的危险。所以一定要保证实验室有良好的通风系统。
1、高惰性超纯中性硅胶制成,每根色谱柱同时提供柱效与填料性能报告; 2、半制备色谱采用目前的设计方式即顶端自带手动加压装置,具有国际的轴向压缩技术; 3、与国内单位合作即柱筒内壁采用精密的抛光技术和同心化技术,使往壁的光洁度(>}12,即表面粗糙度尺a }0.1 um)超过了国内外同类产品并保证了柱管的同心度(0.2um),很好的保证了产品质量的稳定性和; 4、能维持足够高内压,柱床不会塌陷导致柱效急剧下降;如果柱床出现松动塌陷,无需任何工具,只需轻轻旋动顶 端加压装置,便能恢复原柱内压力和柱效;制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。
柱压高⑴缓冲液盐分如(铵等)沉积于柱内;⑵样品污染沉积。处理对于种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,换成冲洗,接着用+异(4+6)冲洗柱子,再用换成冲洗,然后用纯水冲洗,后冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。无指示⑴泵密封垫圈磨损;低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。⑵大量气泡进入泵体。处理对于种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。不稳定原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有的烧杯用超声波清洗。