制备液相色谱仪高***的选择【赛尔夫】
柱色谱法( Column chromatography)所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效果有影响,应予注意。吸附剂的填装 干法:将吸附剂一次加入色谱管,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相,或将色谱管下端出口加活塞,加入适量的流动相,旋开活使流动相缓缓滴出,然后自管顶缓缓加入吸附剂,使其均匀地润湿下沉,在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。湿法:将吸附剂与流动相混合,搅拌以除去空气泡,徐徐倾入色谱管中,然后再加入流动相,将附着于管壁的吸附剂洗下,使色谱柱表面平整。俟填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下,液面将柱表面相平时,即加试样溶液。试样的加入 除另有规定外,将试样溶于层析时使用的流动相中,再沿色谱管壁缓缓加入。将色谱柱连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。注意勿使吸附剂翻起。或将试样溶于适当的溶剂中。与少量吸附剂混匀,再使溶剂挥发去尽后使呈松散状;将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。如试样在常用溶剂中不溶解,可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。洗脱 除另有规定外,通常按流动相洗脱能力大小,递增变换流动相的品种和比例,分别分部收集流出液,至流出液中所含成分显著减少或不再含有时,再改变流动相的品种和比例。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。



如果流路管中真漏气了怎么办?

建议是用外力使管路中充满液体。

具体如下:

1、找到流路管进入输送泵的接头。

2、拧下来。

3、用一干净洗耳球的尖1端对准管路的平整切口。

4、吸液体,看液面从流动相瓶里上升,至离洗耳球5cm左右时停止该动作。

5、快速把接头拧回输送泵上(这个过程可能会有少许流动相外泄,这是正常现象)。

6、开机,开排液阀门,启动输送泵。

7、等排液管中流出的溶液没有气泡时,再关闭排液阀,仪器正常工作。

输送泵和柱子:这些部分进了气泡一般不怕,冲掉就行。




随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的脱落。色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,现代生物企业生产过程中的***技术之一。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。

正相色谱法与反相色谱法比较表

正相色谱法 反相色谱法

固定相极性 高~中 中~低

流动相极性 低~中 中~高

组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出







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