柠檬酸是代谢过程中的中间产物。在发酵过程中，当微生物体内的乌头酸水合酶和异柠檬酸脱氢酶活性很低、而柠檬酸合成酶活性很高时，才有利于柠檬酸的大量积累。 [9] 发酵工艺分表面发酵和固体发酵，按不同工艺制备不同原料的培养基，然后进行蒸料。蒸料的目的是将淀粉糊化，并进行灭菌。蒸料时要使物料受热均匀，蒸汽通畅，边蒸边加料，把料加在冒汽的地方，逐层加入。蒸好的物料要扬散摊凉，当温度降至37℃以下，即可补水接种，装盘发酵，发酵终点以酸度来决定，定期测定酸度，保证在酸度时出料，山梨酸钾，以免柠檬酸被细菌分解。

(1)萃取法将未成熟的苹果、葡萄、桃等的果汁煮沸，加入石灰水，生成钙盐沉淀，然后再经处理生成游离苹果酸。(2)合成法将苯催化氧化，得到马来酸和富马酸，然后在高温和加压下水合。水合反应的条件通常是在180—220'C和1．4一1．8MPa压力下反应3—5h。反应生成物主要是苹果酸和少量反丁烯二酸，调节苹果酸在40~C的含量为40%并使溶液冷却到约15'C，过滤分离反丁烯二酸晶体，母液浓缩，离心分离固体，得粗苹果酸，再经精制结晶得成品。(3)发酵法从反丁烯二酸利用生物酶发酵生产左旋苹果酸。








目前，L-苹果酸的生产方法已由早期的单一的提取法发展到以下几种方法:提取法、化学合成法、一步发酵法、二步发酵法、固定化酶或细胞转化法[2]。目前，存在的问题仍是缺少优良生产菌株，在研究选育优良菌株的同时，注重加强提取工艺等相关技术的研究，搞好上下游工程配套技术的研究开发是非常必要的。苹果酸有L一苹果酸、D－苹果酸和DL-苹果酸3种异构体。天然存在的苹果酸都是L型的，几乎存在于一切果实中，以仁果类中。








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