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外泌体电镜价格合理「多图」
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外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。外泌体(Exosome)是一种能被大多数细胞分泌的直径大约40-100nm的微小膜泡,天然存在于体液中。2007年, Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌 的 exosom e可以被人的肥大细胞捕获,并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质,不仅仅是mRNA,exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性,在进入后可以靶向调节细胞中mRNA的水平。这一发现使得研究人员对exosome的研究热情激增,截止目前已经通过286项研究发现了41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向***提供的生物技术服务。分离后的外泌体也可采用印迹、流式细胞术等技术鉴定特异性表面蛋白标志物。
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从外泌体分离上讲,常见的方法有:差速离心法、梯度密度离心法、试剂盒、凝胶排阻分离法、膜亲和试剂盒等诸多方法。外泌体分离之后的鉴定工作也是外泌体科研工作者重点工作内容之一。常用的鉴定方法包括:外泌体电镜检测、NTA粒径检测、WB检测、外泌体胶体金检测。在实际操作中,因为样品及浓缩方法不同,得到的额外泌体纯度和浓度差别很大。这给后续鉴定工作增加了很多困扰。将标记的外泌体加入受体细胞培养基中,与受体细胞进行共培养,观察细胞的功能变化,如细胞增殖、迁移与侵袭、细胞凋亡等。
聚乙二醇(PEG)可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀,早期应用于从血qing等样本中收集病毒,现在也被用来沉淀外泌体,其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。在4℃利用PEG孵育后通过过滤或离心即可沉淀、回收外泌体。采用此种分离方法也存在不少问题:纯度和回收率低,杂蛋白较多,机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等。于外泌体功能的研究方法,利用Py宿主的血浆外泌体作为条件处理,与内皮细胞共培养,通过检测处理前后基因差异表达情况,结合实验验证,进一步揭示其在发展过程中的作用机制,为新型制剂的开发提供了新的思路。