亚细胞定位-思特进(在线咨询)





武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。




胞质Ca~(2+)是重要的第二信使,通过Ca~(2+)结合蛋白产生磷酸化信号级联,调控下游基因表达。钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentprotein kinases,CDPKs)是一类仅在植物和部分原生生物中存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在钙信号转导中具有重要功能。越来越多的证据表明,CDPKs广泛参与植物生长发育、病原防御、非生物环境胁迫等生理反应的信号传递过程。目前在水稻中已发现31个CDPKs基因,但功能明确的只有少数几个基因,本研究的目的就是利用超量表达和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,为利用基因工程技术培育水稻新品种提供新的基因资源和理论指导。本研究的主要试验结果如下: 1.通过RT-PCR方法检测了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三个基因在粳稻品种日本晴分蘖期的根、成熟叶片、穗尖至剑叶叶枕距离分别为0 cm、0-1cm、1-3 cm、3-5 cm、5-8 cm、8-12 cm、12-16 cm、16-20 cm、20-25 cm、25-30 cm、灌浆期稻穗(命名为P1-P12)中的表达谱。试验结果显示:OsCPK2和OsCPK29时期稻穗中表达量较高,在成熟叶片和P12时期稻穗中表达量很低,在分蘖期的根和幼穗中不表达;而OsCPK15在所检测的各个组织和时期中表达量均很高。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。





GaMYB2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A 中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图B 中发现GaMYB2-GFP 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。


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F-box蛋白通过在UPP(泛素-蛋白酶体途径)中特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、信号转导等生命活动。很多研究结果表明F-box蛋白通过SCF复合体调节多种的信号转导途径,如IAA、JA、GA和乙烯的信号传导,并且与植物对非生物胁迫的响应有很大的关系。故其对植物抗逆性研究有重要意义。鹰嘴豆是大豆类作物,主要生长在干旱和半干旱地区。它具有生育期短,基因组小的特点。经过长时间的进化和对不良环境的适应,鹰嘴豆具有了丰富的耐旱、耐低温和耐盐碱等抗逆基因,因此具有其自身的优势来研究植物的抗逆机制。目前,鹰嘴豆在分子生物学方面的研究较为少。 本研究从EST库中挑选到两个F-box蛋白基因在干旱胁迫下表达,亚细胞定位,采用RACE技术其全长,并对目的基因进行了初步的生物信息学分析和转录水平的表达谱分析,旨在为进一步揭示鹰嘴豆F-box蛋白在植物的生长发育及在逆境信号传导中的作用奠定理论基础。 CarF-box1基因的开放阅读框(ORF)长1093bp,编码一条345个氨基酸残基的多肽,含有F-box结构域和Kelch结构域。其理论等电点为5.38,分子量为38.37kDa。CarF-box1基因不含有内含子。荧光定量PCR分析表明,CarF-box1在鹰嘴豆的根、茎、叶、花、成熟豆和成熟荚中均有表达,在花中表达极高。

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