武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
大豆[Glycine max(L.)Merrill]是我国主要的粮食作物和油料作物,但土壤盐渍化成为影响大豆生长和产量的主要限制因素之一。近年来,基因工程技术被广泛应用于提高植物的耐盐性,将抗逆基因导入优良大豆品种,培育抗逆高产新品系,为解决这一问题提供了新途径。目前已有多个耐盐相关基因应用于植物抗逆研究,其中Na+/H+逆向转运蛋白基因家族研究较为深入,其主要作用是通过将细胞质内的Na+外排到胞外或者将Na+区隔化到液泡中,来维持细胞内的Na+稳态和Na+/K+比相对稳定,从而减少盐胁迫对植株造成的伤害。但有关大豆Na+/H+逆向转运蛋白基因的生物学功能分析以及应用的研究还很少。本研究以超表达Gm NHX1基因的拟南芥及酵母nhx1缺失突变体为材料,通过非损伤微测技术、real-time PCR以及酵母互补试验,验证Gm NHX1基因的耐盐功能;借助基因法转化洋葱,观察Gm NHX1蛋白的亚细胞定位。在此基础上,利用根癌农介导的大豆子叶节转化法进行Gm NHX1基因的遗传转化。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
多胺作为一种多聚阳离子,在基因表达、蛋白活性等多层面调节细胞功能。多胺转运蛋白能够特异性介导多胺类物质跨膜运输,在调节多胺浓度、调控抗性基因表达、维持mRNA水平、增强植物抗逆性等方面具有重要功能。目前,已知拟南芥(Arabidopsis thaliana)LHR1基因编码质膜多胺转运蛋白AtPUT3,控制多胺的吸收,参与植物热胁迫早期反应中的分子调控过程,亚细胞定位,但水稻中(Oryza sativa),多胺参与植物热胁迫早期反应的具体分子机制尚不明确。通过序列对比,发现水稻Os02g47210和Os03g37984是拟南芥AtPUT3的功能同源基因。为了初步阐明水稻多胺转运蛋白LHR1在热胁迫早期防御反应及提高植物耐热性上的功能,本研究利用生物信息学、生化与分子生物学实验、遗传学等手段对水稻LHR1同源基因的功能进行初步研究,结果如下:1.了水稻OsLHR1(Os03g37984.1、2、3和Os02g47210)基因全长CDS,并对该基因编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:Os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种OsPUT3蛋白。
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