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环境条件

无菌环境:无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活1体内,解1毒系统和免1疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的侵入,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免1疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解1毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性,可与细胞长期共存,对细胞有潜在影响,但体积小,不易鉴别,可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快,在短时间内即可大量扩增,并产生毒1素杀1死细胞。真菌的种类繁多,肉眼可见,漂浮于培养液面上,可呈丝状、管状或树枝状等。



iPS存在的风险

1. iPS 与ES细胞基因表达虽很相似,但iPS细胞存在遗传缺陷.

2. iPS细胞的成瘤性,不同体细胞来源的iPS细胞成瘤性有差异.因此,应选择适当的供体细胞或筛选安全型IPS细胞克服IPS细胞临床cure的成瘤性.

3. iPS细胞及其体外诱导分化细胞的异质性.体细胞重编程不充分(partiallyreprogrammed IPSCs)、筛选标准不严紧和iPS细胞携带供体.细胞的表观遗传记忆和iPS 细胞分化不定向都导致细胞异质性,异质性是导致iPS细胞成瘤的潜在因素

4. iPS细胞体外定向分化细胞的功能与行为研究尚少,尤其在细胞cure上,目的细胞是否会在cure靶位或迁移到非靶位点成瘤,或异位形成组织等是亟待阐明的问题.



细胞膜包着的黏稠透明的物质,叫做细胞质(Cytoplasm)。在细胞质中还可看到一些带折光性的颗粒,这些颗粒多数具有一定的结构和功能,类似生物体的各种,因此叫做细胞器。例如,在绿色植物的叶肉细胞中,能看到许多绿色的颗粒,这就是一种细胞器,叫做叶绿体。绿色植物的光合作用就是在叶绿体中进行的。在细胞质中,往往还能看到一个或几个液泡,细胞增殖检测试剂盒,其中充满着液体,叫做细胞液。在成熟的植物细胞中,液泡合并为一个中央大液泡,其体积占去整个细胞的大半。细胞质被挤压为一层。细胞膜以及液泡膜和两层膜之间的细胞质称为原生质层。



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