细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但的干扰可抑制凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从干扰组细胞数大于对照组的事实说明可促进细胞增殖的结论。所以直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克X隆形成。
与其他三维细胞培养系统相比,RCCS生物反应器的优点是什么?
将细胞嵌入盘或者多孔板的三维细胞外基质为近常用的三维细胞培养方法。这个方法虽然可以产生相对不错的3D组织模型,但是它又被有限的物质传递(这是由于培养的静态特性,也因为基质对于物质传输是一个额外的屏障)和缺乏可测量性所限制。动态的培养系统,例如搅拌瓶,或者大规模的搅拌罐提供了非常好的物质传递,但是这些系统使用的机械应力,不仅损坏细胞,而且还阻止了它们的聚集。
原代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大,三维细胞培养,是检测很好的实验对象,永生化细胞株也是从原代1开始的,但导入了病毒增殖基因等,跟原代是不同的,而且“50代(大概的)以前的细胞和之后的细胞比较,之后的遗传物质已经改变,并不再具有接触生长抑制现象。这些细胞带有ai变细胞的特点“。在养原代细胞和永生性细胞株的过程中发现,永生细胞株形态及整理状态不如原代,但可以相对长时间传代,而原代有代数限制,这是永生细胞株的一大优势。原代细胞具有着可持续传代;生物性状发生变化;仍保留亲体组织的遗传特征;接近和反映体内生理特征等优势。