低温生物筛选过程及应用价值

分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开，并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选，进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节，但却不能绝然分开，因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用。工业微生物产生菌的筛选一般包括两大部分:一是从自然界分离所需要的菌株，二是把分离到的菌株进一步纯化并进行代谢产物鉴别。 ? {cF'RB. 在实验工作中，为使筛选达到事半功倍的效果，总的说来可从以下几个途径进行收集和筛选: 4jis﹨W}%L3

(1)向保藏机构索取有关的菌株，从中筛选所需菌株。 ^ 5u}      

(2)由自然界采集样品，如土壤、水、动植物体等，从中进行分离筛选。 O|%> <I? I

(3)从一些发酵制品中分离目的菌株，如从酱油中分离蛋白酶产生菌，从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌等。该类发酵制品经过长期的自然选择，具有悠久的历史，降氨氮低温生物菌种价格，从这些传统产品中容易筛选到理想的菌株。 r N$_(%m_N

菌株的分离和筛选一般可分为采样、富集、分离、产物鉴别几个步骤。 8*4X%a=O f

 含微生物样品的采集  Q?7U  iTZ

自然界含菌样品极其丰富，土壤、水、空气、枯枝烂叶、植物病株、烂水果等都含有众多微生物，种类数量十分可观。但总体来讲土壤样品的含菌量很多。  G+^H Z4jg

低温生物的孢子分离法

( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体，洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟，然后连同培养基一起放入接种箱内，经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时，再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹，把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种，然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养，可得纯。

( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布，置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后，便落下孢子，多功能复合低温生物菌种报价，形成印痕(即孢子印)。然后，用接种环或玻璃棒蘸取孢子，接种在平面或斜面培养基上，进行恒温培养，可得纯。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘，直径25 厘米左右，垃圾渗滤液低温生物菌种价格，盘内先垫衬4~6 层纱布，中央放1 副9 厘米直径的培养皿，大盖口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架，再将带孔的玻璃钟罩盖上，顶上罩孔用棉塞塞好，用纱布包好整个孢子收集器，置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。

                                                       低温生物菌种为什么能适应低温环境？

微生物对温度的要求不同与它们的膜结构物理化学性质有密切关系 根据细胞膜的液体镶嵌模型，细胞在正常生理条件下，膜中的脂质成分应保持液晶状态，只有当细胞膜处于液晶状态，才能维持细胞的正常生理功能，使细胞处于生长状态微生物的生长温度与细胞膜的液晶温度范围相一致。 
      1、蛋白质结构 

通过对嗜冷酶的蛋白质模型和x一射线衍射分析表明，嗜冷酶分子间的作用力减弱，与溶剂的作用加强，酶结构的柔韧性增加，使酶在低温下容易被底物诱导产生催化作用。

2、蛋白质合成 
嗜冷菌具有在0℃合成蛋白质的能力。这是由于其核糖体、酶类以及细胞中的可溶性因子等对低温的适应，蛋白质翻译的错误率相对低。许多中温菌不能在O0C合成蛋白质，低温生物菌种，一方面是由于其核糖体对低温的不适应，翻译过程中不能形成有效的起始复合物，另一方面是由于低温下细胞膜的破坏导致氨基酸等内容物的泄露。
       3、合成冷蛋白 

低温微生物适应低温的另一机制是合成冷休蛋白 将大肠菌从370C突然转移到100C条件时细胞中会诱导合成一组冷休蛋白，它们对低温的生理适应过程中发挥着重要作用，检测嗜冷酵母的冷休反应，发现冷刺激后冷休蛋白在很短时间内大量产生。 耐冷菌由于生活在温度波动的环境中，它们必须忍受温度的快速降低，这与它们产生的冷休蛋白是密切相关的。

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