灵敏度

通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值，计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。

OD(B0平均数) =0.685± 0.003

OD（5号 标准品平均数）=0.604± 0.010

光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081

2 SD's of the Zero Standard =0.006

灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL

洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

底物是光敏感的，要在临用前现配。

检测前，要打开酶l标仪，使之稳定10分钟以上。

底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

待检样品要澄清，否则会影响结果。

温浴时间应遵守试剂盒规定。

应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。

对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

ELISA的基础是抗原或抗l体的固相化及抗原或抗l体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗l体仍保持其免l疫学活性，cAMP assaykit，酶标记的抗原或抗l体既保留其免l疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗l体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗l体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗l体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗l体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免l疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗l体。然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
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