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4、PCR实验室试剂的操作。

⑴所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。⑵所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水,用0.22μm过滤的,并且是高压灭菌。⑶在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂,在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。⑷所用试剂都应该以大体积配制,实验一下看试剂是否满意,然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。⑸所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。⑹新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。⑺样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。



传统的微生物检测实验室采取建造缓冲间,使实验室与外界隔离,在进行实验操作时不受外界气流的影响,洁净车间装修,使实验检测不污染。但由于室内空气不流通,室内空气混浊,夏季工作室内气温高,冬季室内气温低,不但对微生物工作者的身体影响较大,而且还影响实验检测。近年来,室内空调的使用,造成微生物实验室内气流混乱,直接影响检测结果。因此,根据卫生防疫系统的业务工作要求,洁净车间,设计能适应无菌检测,杀灭效果试验,卫生指标检测,病原体分离鉴定,流行病分子生物研究的微生物检测洁净实验室是必然趋势,它不同于其他工业洁净室,开展不同内容的微生物检测工作,均有特殊的要求。我们设计的微生物洁净实验室,具备以下几方面的要求。

1、洁净室采用上送下回的气流方式,层流罩送入100级洁净风,洁净车间工程,环境送入1000级洁净风,要求在层流罩隔离屏去掉情况下,工作台面的100级洁净度不受影响。室内顶部四周不形成气流死角。



Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复1制。通过DNA基因追1踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精1确度高达纳米级别。

PCR实验室建立方法


1、建立样品准备区

这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施:⑴PCR产物和带有要扩增序列的DNA克1隆不能在这个房间操作。⑵组织培养物、组织标本和血1清样品都带进样品准备间处理,洁净车间施工找哪家,以根据应用的需要提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的工具不能被用作普通分子克1隆的工具,也不能用作操作靶序列。⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。





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