β-内酰胺酶测量分析仪碘量法

[原理]β-内酰胺酶能裂解青霉的β-内酰胺环形成青霉唑酸，它与淀粉竞争游离碘，破坏了碘和淀粉的兰色复合物，使兰色变为无色。

[方法] ①将0.25克.青霉溶于41.7mlPH6.0 的磷酸盐缓冲液中，β-内酰胺酶测量分析仪价格，使其浓度成6000ug/ml。 取0.1ml

于一小试管中。

②将培养18-24小时的细菌在含青霉试管内制成浓厚菌悬液(109/ml)。

③在37'C水浴中放置30分钟，不时摇动，使酶能破坏青霉。

④加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml，摇匀。

⑤加入碘液 0.02 ml。

⑥在 37°C水浴中放置10分钟，观察结果。

[结果]在10分钟内能使兰色完全消退的菌株为β-内酰胺酶阳性，不消退者为阴性。

[注意事项] 

①由于青霉很容易分解，因而用于实验的青霉应新鲜配制。

②淀粉也新鲜配制，在100ml蒸馏水中加入1克可溶性淀粉，放到开水中水浴直到淀粉溶解。

③实验应 按照步骤操作，牛奶β-内酰胺酶测量分析仪价格，如果碘加得过早，酶反应就会停止，产生假阴性结果。

④每次试验用阳性和阴性对照。

β-内酰胺酶测量分析仪4种途径

(1)产生β-内酰胺酶使β-内酰胺类抗生素开环失活，这是产生耐药的主要原因。目前发现的β-内酰胺酶已超过300种，它通过与β-内酰胺环上的羰基共价结合，水解酰胺键从而使β-内酰胺类抗生素开环而失活。

(2)改变抗生素与青结合蛋白( penicllin binding proteins，PBPs) 的亲和力。当β-内酰胺类抗生素与PBP结合后，乳品β-内酰胺酶测量分析仪价格，PBP就会失去酶活性，使细菌细胞壁的形成部位破损而引起溶菌，反之，则，牛奶β-内酰胺酶测量分析仪价格，成为耐药菌。PBP 基因的变异，使β-内酰胺类抗生素无法与之结合或结合能力降低，这是形成耐药的根本原因。

(3) 细胞膜和细胞壁的结构发生改变，使难以进入细菌内。如生物膜的形成。

(4)细菌体内的能力依赖性主动转运机制，将已进入细菌内的抗生素泵出体外，也可导致耐药性。

β-内酰胺酶测量分析仪化学结构

β-内酰胺类抗生素共同的化学结构是，其分子中都含有一个四元的β-内酰胺环。这个β-内酰胺环是该类抗生素发挥生物活性的必需基团。在和细菌进行战斗的时候，这个β-内酰胺环打开成开环姿态，与细菌发生酰化作用，以此和细菌进行。  这个β-内酰胺环由四个原子组成，环的张力比较大，使它的化学性质不够稳定，可能在还没有进入战斗状态时就已经发生开环，导致自身失活，还没杀敌呢就已经没了。

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