液相色谱柱外界因素影响

色谱是一种分离分析手段，分离是，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3，5，TSKgel Protein C4-300，7，10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。

柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。即使好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。

气相色谱仪检测器介绍

检测器原理：

从色谱柱里出来的  含有分离组分的载气流通过检测器而产生信号，检测器的输出信号经过转化后成为色谱图。

检测器有几种类型，但检测器的功能都是相同的：

当纯的载气（没有待分离组分），

流经检测器时，产生稳定的电信号——基线

当有待分离组分通过检测器时 产生不同的信号

气相色谱检测器种类繁多，有多种分类：

①根据对被检测样品的响应范围可以被分为：

通用型检测器：对绝大多数检测无知均有响应，如：TCD、PI。

选择型检测器：对某一类物质有响应，对其他物质的无响应或很小，如：FPD。

②根据检测器的检测方式不同可以分为：

浓度型检测器：测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，TSKgel Protein C4-300价格，即检测器的响应值和组分的浓度成正比，如TCD、PID。

质量型检测器：测量载气中某组分单位时间内进入检测器的含量变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的质量成正比，如FID、FPD。

③根据信号记录方式不同进行分类：

微分型检测器：微分型检测器的响应与流出组分的浓度或质量成正比，绘出的色谱峰是一系列的峰。

积分型检测器：测量各组分积累的总和，响应值与组分的总质量成正比，色谱图为台阶形曲线，阶高代表组分的总量。

④根据样品是否被破坏可以分为：

破坏性检测器：组分在检测过程中，其分子形式被破坏，例如：FID、NPD、FPD。

非破坏性检测器：组分在检测过程中，TSKgel Protein C4-300采购，保持其分子结构，例如：TCD、PID、ECD。

液相色谱柱流动性

1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。

2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤，消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，TSKgel Protein C4-300哪家好，以免柱性能损坏（添加5%的冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。还可以使色谱柱更容易平衡）。

3、流动相需脱气后使用，可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别，应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。

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