离子交换层析中，为什么用氯离子洗脱阴离子

阴离子交换柱的填料是正电填料，在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质（如DNA）.这些带负电的物质由于其带电量不同，分子大小不同，因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子（一般用氯化钠梯度，东曹TOYOPEARL纯化填料，例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠）洗脱挂柱样品时，氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料，伴随着氯离子浓度的不断升高，氯离子的竞争作用越来越强，与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来，形成独立的洗脱峰，从而将这些物质分开.

阳离子交换柱与之正好相反，柱子填料为负电荷，用钠离子洗脱结合的正电物质.

选择层析方法

用分离范围宽广的凝胶过滤介质如Superose， Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份

用含专一配体或的亲和层析介质结合目标蛋白，一步即可得到高纯度样品;亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质

体积大的样品，往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化;高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化

疏水层析用高盐吸附，低盐洗脱的原理，洗脱的样品又可直接上离子交换介质;两种方法常被交替使用

亲和层析

配体偶联在介质上，纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强，东曹TOYOPEARL纯化填料报价，所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便，以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG

金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属，再用已结合依赖不同金属的蛋白，一种介质可做多种纯化工作

其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III，东曹TOYOPEARL纯化填料采购，凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白，东曹TOYOPEARL纯化填料价格，干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖，糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.

可自行把所需配体偶联到活化偶联介质，的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中

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